Etude de la production d'alcaloides tropaniques chez le datura innoxia mill. Cultive in vitro : impact physiologique de l'immobilisation des cellules au sein d'une matrice d'alginate de calcium

par ERIC GONTIER et J.-N. BARBOTIN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Brigitte Singh Sangwan-Norreel.

Soutenue en 1993

à Amiens .

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  • Résumé

    La technique de dosage par hplc des deux principaux alcaloides tropaniques produits par le datura innoxia mill. A ete mise en place. Les travaux portant sur l'extraction, la purification et l'analyse permettent de detecter et de doser l'hyoscyamine, la scopolamine mais egalement l'acide tropique, le tropinone, la 6b-hydroxyhyoscyamine, la littorine et le 3b-tigloyloxytropanol. Les cellules cultivees en suspension croissent bien mais produisent moins d'alcaloides que les plantes entieres (de l'ordre du ug/g de poids de matiere seche). L'immobilisation au sein d'une matrice d'alginate de calcium n'altere pas la viabilite des cellules. Nous avons montre que dans ce cas, le calcium ameliore la synthese alcaloidique. Il semble qu'il engendre une augmentation de l'activite de la putrescine n-methyltransferase, une des premieres enzymes de la voie de biosynthese de la scopolamine. La modification des conditions culturales peut aussi permettre une meilleure production alcaloidique ; cependant, jamais les niveaux atteints ne sont comparables a ceux des plantes entieres ou des cultures d'organes. En parallele, nous avons montre que la micropropagation par culture de bourgeons axillaires permettait l'obtention de copies globalement conformes aux plantes de depart. Cette technique est neanmoins a l'origine d'une variabilite epigenetique plus importante que la variabilite genetique naturelle obtenue au cours de l'autofecondation


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Informations

  • Détails : 208 P.
  • Annexes : 243 REF.

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