Etude du rôle des annexines dans la modulation des phospholipases A2 et la tyrosine phosphorylation induite par divers facteurs de croissance

par Jean-Pierre Salles

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Hugues Chap.

Soutenue en 1992

à Toulouse 3 .


  • Résumé

    Les annexines, proteines intracellulaires ayant des homologies de sequence et des caracteres biochimiques communs: liaison au calcium et aux phospholipides, interactions avec le cytosquelette et les membranes biologiques, sites de phosphorylation, sont etudiees pour diverses proprietes biochimiques. Une partie bibliographique decrit les proprietes des annexines, et analyse leur role possible en physiologie, puis decrit la cellule mesangiale renale, support d'etudes metaboliques realisees avec les annexines: caracteres en culture, reponse aux divers mitogenes, voies de signalisation en reponse aux hormones. La partie experimentale decrit d'abord la purification des annexines: elution des membranes par les chelateurs du calcium, chromatographie d'echange d'ions en hplc et affinite sur colonne de phosphatidylserine en presence de calcium. L'endonexine i ou annexine iv purifiee demontre une activite inhibitrice in vitro vis-a-vis de la phospholipase a#2 de pancreas. Puis est exposee l'existence d'auto-anticorps vis-a-vis de l'annexine vi chez l'homme, detectes par methode elisa, electrotransfert et immunoblotting. Ensuite, les annexines sont caracterisees dans le tissu renal par immunofluorescence et par separation physique des composants du tissu renal. On montre la predominance des types i et vi d'annexine dans le rein et ses sous-fractions. Enfin, les annexines de la cellule mesangiale sont phosphorylees par le #3#2p orthophosphate. L'immunoblotting avec des anticorps anti-phosphotyrosine et la separation sur couche mince des residus phosphoryles marques apres hydrolyse acide de la proteine immunoprecipitee montrent une tyrosine-phosphorylation de l'annexine i, stimulee par l'egf, l'angiotensine ii, l'endotheline et l'arginine vasopressine, ayant lieu par deux voies de signalisation differentes: recepteur tyrosine-kinase et activite kinase non recepteur

  • Titre traduit

    Studies on the role of annexins in the modulation of phospholipases a#2 activity and in the tyrosine-phosphorylation induced by various mitogens


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Informations

  • Détails : 176-[4] f

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  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1992TOU30216
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