Clonage de la nadph-cytochrome p-450 reductase et d'une proteine calnexine-like chez helianthus tuberosus l

par MARIE-PAULE HASENFRATZ

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de FRANCIS DURST.

Soutenue en 1992

à Strasbourg 1 .

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  • Résumé

    La nadph-cytochrome p-450 reductase (cpr) est une enzyme indispensable au fonctionnement des monooxygenases a cytochrome p-450. A partir d'arn messagers extraits de tissus de tubercules de topinambour (helianthus tuberosus), enrichis en cpr, deux banques d'adnc ont ete construites, l'une dans gt10 et l'autre dans g11. Le criblage de la banque d'expression a l'aide d'anticorps anti-cpr de topinambour, a conduit a isoler et sequencer un clone, mp2001. Il represente un adnc complet, de 1866 pb, qui code pour une proteine d'environ 62 kd. Cette proteine possede des homologies significatives (54%) avec l'antigene ral-1 d'onchocerca volvulus et avec la calreticuline et une homologie importante (61%) avec la calnexine, une proteine microsomique fixatrice de calcium. La banque dans gt10 a ete criblee avec une sonde de cpr d'arabidopsis thaliana. Ce criblage a permis la selectin de plusieurs clones de cpr de topinambour qui possedent, entre eux, de 80 a 100% d'homologie. La sequence determinee la plus grande, possede 2111 pb et correspond a un transcrit de 2,4 kb. Il n'a pas ete determine, pour l'instant, si les forems multiples mises en evidence correspondent a des variants alleliques ou s'il existe plusieurs genes codant pour les differentes formes de cpr decrites chez le topinambour. Les domaines fonctionnels (zones de fixation des cofacteurs) sont fortement conserves entre les cpr vegetales et celles deja decrites chez la levure et differentes classes d'animaux. De plus, l'analyse des sequences montre l'existence de regions specifiques, tres conservees, chez les trois cpr de plantes, sequencees jusqu'a present

  • Titre traduit

    Cloning of nadph-cytochrome p-450 reductase and of a calnexin-like protein from helianthus tuberosus l


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  • Annexes : 172 REF

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  • Cote : Th.Strbg.Sc.1992;1421
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  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : H 503.000,1992
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