Structure chromatinienne et activite des genes. Mise en evidence et caracterisation in vitro et in vivo de la proteine gebf-i, un activateur du gene sgs3 chez drosophila melanogaster

par Philippe Georgel

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et moléculaire

Sous la direction de MARIA BELLARD.

Soutenue en 1992

à Strasbourg 1 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Notre equipe etudie les relations entre la structure chromatinienne et l'expression des genes, avec comme modele le gene sgs3 chez drosophila melanogaster. L'utilisation de larves transgeniques a revele, en amont du site d'initiation, deux zones regulatrices: la zone a, de 130 a +1, responsable des specificites tissulaire et temporelle d'expression du gene ainsi que de la reponse a l'ecdysone; la zone b, de 1300 a 130, responsable du niveau eleve de l'expression du gene. La cartographie des sites hypersensibles a la dnase i (dhs) a revele dans la zone b un complexe de trois dhs dont celui a 600 est etroitement correle a l'activite du gene dans les glandes salivaires au troisieme stade larvaire et possede certaines caracteristiques des elements cis-activateurs (enhancers). Par l'etude in vivo de la structure chromatinienne de cette region nous avons directement montre l'existence d'un nucleosome positionne sur la region 600 lorsque sgs3 est inactif et que l'activation du gene s'accompagne du deplacement de cette structure. Parallelement, une proteine gebf-i, dont la presence suit l'activite du gene a ete caracterisee. Elle se lie simultanement a deux sites d'une sequence de 63 pb centree a 600. L'utilisation de mutants dans le locus 2b5, inductible par l'ecdysone, montre que la presence de gebf-i est liee a l'expression de ce locus. Grace aux larves hybrides issues du croisement entre d. Melanogaster et d. Simulans, des modifications post-traductionnelles importantes pour la liaison de gebf-i ont ete mises en evidence. Avec des larves transgeniques dans lesquelles les sites de liaison de gebf-i ont ete mutes, nous avons montre, in vivo, l'implication directe de cette proteine dans la regulation du niveau d'expression de sgs3 et dans le fonctionnement de l'enhancer par deplacement d'un nucleosome positionne. L'ensemble de ces resultats conduit a penser que le role des activateurs de la transcription ne peut etre etudie independamment de l'engagement de l'adn dans la structure chromatinienne

  • Titre traduit

    Chromatin structure and gene expression in vitro and in vivo characterization of gebf-i, an activator of the sgs3 gene in drosophila melanogaster


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  • Annexes : 166 REF

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1992;1387
  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : H 503.000,1992
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