Contribution a l'etude des proteases de la membrane mitochondriale interne de saccharomyces cerevisiae

par ANITA PIRMAN-LORIN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de André J.C. Stahl.

Soutenue en 1992

à Strasbourg 1 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Quatre methodes de subfractionnement mitochondrial ont ete testees pour obtenir les membranes mitochondriales internes les plus riches en activite proteolytique. Nous avons choisi la methode consistant en une lyse hypotonique apres preincubation en presence d'atp des mitochondries. Quinze detergents non ioniques et zwitterioniques ont ete etudies pour l'extraction des proteases; le tween 20 s'est montre le plus performant. Un controle des contaminations a ete effectue par le dosage des enzymes marqueurs des compartiments mitochondriaux et du cytoplasme. Les activites proteolytiques de l'extrait ont ete dosees grace a des proteines exogenes et des substrats synthetiques. Les substrats retenus sont des caseines radioactives ou fluorescentes et des paranitroanilides renfermant la leucine ou la phenylalanine. La membrane interne contient des endopeptidases et des aminopeptidases. Les proteases ont ete fractionnees par chromatographies d'echange ionique et d'affinite. Une technique d'electrophorese en gel de polyacrylamide additionne de gelatine nous a permis d'etudier les proprietes de ces proteases. Une premiere endopeptidase a ete separee. Elle hydrolyse la liaison peptidique dans laquelle la fonction carboxylique de la phenylalanine est engagee. Une deuxieme serine-endopeptidase de 66 kda a ete partiellement purifiee

  • Titre traduit

    Study of the proteases in the inner mitochondrial membrane of saccharomyces cerevisiae


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Informations

  • Annexes : 59 REF

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1992;1220
  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : H 503.000,1992
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