Etudes biochimiques et physicochimiques de l'adenyl kinase d'escherichia coli

par THIERRY ROSE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Octavian Bârzu.

Soutenue en 1992

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Les adenyl kinases sont des enzymes ubiquitaires (20-26 kda) engagees dans le maintien de l'equilibre energetique cellulaire. Elles catalysent le transfert reversible du phosphate 5 terminal du mg-atp sur l'amp. La structure du complexe de l'enzyme d'e. Coli avec le p1, p5 di (adenosine) pentaphosphate a ete resolu a 1,9 a par diffraction des rayons x. Cette these decrit et discute les observations et les resultats recueillis a partir des etudes de l'adenyl kinase d'e. Coli. Le photomarquage de l'enzyme par le 3 benzoyl (o-benzoyl) (#3#2p) triphosphate marque selectivement le site dans la nomenclature du modele cristallin. La substitution de l'un des 5 residus de la boucle 84-88 (strictement conservee dans les 15 sequences connues) par mutagenese dirigee, nous a permis de deduire des etudes de proteines modifiees et purifiees: le residu asp84 fixe le mg, l'arg88 lie l'amp dans le site b, la phe86 et la pro87 maintiennent un coude de type vib essentiel dans la structure du site actif et le positionnement des substrats. Toutes ces donnees s'accordent au modele reduit des etudes cristallographiques. La suppression de 25 residus (133-157) de la sequence de l'enzyme bacterienne ne supprime ni l'activite catalytique ni la stabilite de la structure de l'enzyme. Cette region est absente des proteines cytosoliques des cellules musculaires d'eukaryites; elle pourrait etre engagee dans des interactions proteine-proteine


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  • Annexes : 315 REF

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-010996
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