Caracterisation de la souche d'agrobacterium tumefaciens 82. 139 et son utilisation pour la transformation genetique du peuplier (populus sp. )

par ANA CRISTINA MIRANDA BRASILEIRO

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Lise Jouanin.

Soutenue en 1992

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Entre 1982 et 1988, plus de 700 isolats d'agrobacterium tumefaciens ont ete preleves dans une pepiniere contaminee par la galle du collet a l'inra d'orleans. Des etudes moleculaires ont montre que les souches les plus representatives de cette population possedaient des plasmides ti presque identiques dans des contextes chromosomiques differents. On a observe que les tumeurs induites par une des souches isolees (82. 139) regenerent spontanement des bourgeons. Ceci a permis de mettre au point une technique originale (coinoculation) de transformation genetique du peuplier (populus sp. ). En parallele, une methode classique de transformation du peuplier (coculture de fragments de tiges) a ete aussi etablie. Ces deux techniques ont ete utilisees pour introduire chez le peuplier un gene de l'acetolactate synthase mute d'arabidopsis thaliana, ce qui a permis de comparer leur efficacite. Ce gene confere la resistance a l'herbicide chlorsulfuron aux peupliers transgeniques. L'analyse de la structure de la region-t du plasmide ti de la souche 82. 139 a permis d'identifier ses oncogenes. Des etudes de complementation fonctionnelle ont montre que les oncogenes de cette souche sont responsables du phenotype shooty des tumeurs. L'analyse de la sequence d'une partie de la region-t a revele des rearrangements structuraux


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  • Annexes : 386 REF

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  • Cote : TH2014-010646
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