Transfert de la sterilite male cytoplasmique par fusion somatique chez le chou-fleur (brassica oleracea var. Botrytis)

Transfer of cytoplasmic male sterility into cauliflower (brassica oleracea var. Botrytis) through somatic fusion

• Auteur / Autrice : NATHALIE DELPIERRE
• Direction : Arlette Nougarède
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Nous avons developpe un protocole de cybridisation simple et efficace en vue de transferer la sterilite male cytoplasmique du radis dans une lignee male fertile de chou-fleur. Ce protocole fait intervenir trois etapes: la regeneration de plantes a partir de protoplastes, la fusion somatique et la selection des cybrides. Grace a l'optimisation de differents parametres, la regeneration de plantes a partir de protoplastes a ete obtenue pour la lignee male fertile et pour les deux parents males steriles. Pratiquement 2% des protoplastes initialement mis en culture produisent un cal regenerant plusieurs bourgeons, les frequences de regeneration etant en moyenne de 93%. Lors des experiences de fusion chimique, nous avons mis en evidence l'importance de la duree d'incubation dans la solution d'elution. Le fait de moduler ce temps d'incubation entraine des variations des taux de fusion de 15 a 40%. Les taux de fusion obtenus dans nos experiences de fusion electrique se sont reveles plus faibles. Mais la viabilite des protoplastes est nettement moins alteree par la fusion electrique que par la fusion chimique. Le systeme de selection protoplastes males steriles irradies/protoplastes males fertiles traites a l'iodoacetate est tres fiable et nous a permis d'obtenir des rendements en protoplastes traites a l'isolement eleves, contrairement au second systeme de selection teste cytoplastes males steriles/protoplastes males fertiles traites a la rhodamine 6g. De plus, nous avons montre que les protoplastes issus des suspensions de protoplastes traites et fusionnes sont capables d'evoluer uniquement s'ils sont cultives avec des cultures nourricieres de protoplastes de tabac. Cinq plantes obtenues lors des experiences de cybridisation presentent les isoenzymes caracteristiques du parent male fertile de chou-fleur, et leur adn mitochondrial s'hybride avec la sonde specifique de la sterilite male cytoplasmique du radis