Les sphingoglycolipides jouent-ils un role dans le processus d'endocytose? approche biophysique a l'aide d'un analogue fluorescent

Do glycosphingolipids play a role in endocytosis? a biophysical approach with the use of a fluorescent analog

• Auteur / Autrice : Émmanuelle Nicolas
• Direction : Paul Vigny
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Ce memoire s'inscrit dans le cadre d'etudes de caracterisation des mecanismes moleculaires du trafic membranaire qui permet les echanges entre compartiments cellulaires. Afin de tester l'hypothese d'un role des glycosphingolipides dans l'endocytose, par formation de microdomaines, on a cherche a suivre dans des cellules vivantes un glycosphingolipide neutre marque au pyrene. Le travail experimental porte sur la definition des conditions d'insertion de l'analogue (galactosyl-ceramide-pyrene) dans la membrane d'un organite cellulaire (vesicule mantelee). Une etude spectroscopique (absorption, emission de fluorescence) fait apparaitre une tendance a l'agregation du marqueur limitant son incorporation. Les spectres d'absorption sont necessaires a l'interpretation des spectres de fluorescence. Pour definir les conditions de marquage de cellules du cortex surrenalien de buf en culture primaire une etude est effectuee par microscopie de fluorescence. Une analyse critique de l'utilisation des analogues fluorescents et les donnees recentes de la litterature sur la caracterisation de complexes proteines glypiees/glycosphingolipides, amenent a proposer une seconde hypothese de travail pour la participation des glycosphingolipides dans les processus du trafic membranaire intracellulaire