Etude de la detoxication des milieux de culture cellulaire. Application a l'elimination de l'ammoniaque

par DELPHINE CARBONELL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de PIERRE NABET.

Soutenue en 1992

à Nancy 1 .

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  • Résumé

    Actuellement, la production industrielle de molecules biologiques a haute valeur ajoutee est essentiellement assuree par des cellules animales cultivees in vitro, en mode batch ou fed batch. La productivite des cultures est cependant limitee par la mort rapide des cellules, generalement attribuee a l'epuisement de nutriments et/ou a l'accumulation de metabolites toxiques. L'ammoniaque represente un des principaux composes incrimines dans la toxicite des cultures. Cinq procedes de detoxication, destines a l'eliminer en continu et sterilement des milieux, sont experimentes: deux procedes biologiques, reposant sur la mise en uvre d'une reaction catalysee par une enzyme, la glutamate deshydrogenase ou la glutamine synthetase, trois procedes physico-chimiques, representes par le stripping, l'utilisation de clinoptilolite et l'application de membranes hydrophobes microporeuses. L'examen des resultats obtenus a conduit au developpement des deux systemes les plus performants, bases l'un sur l'elimination des ions ammonium par echange d'ions sur clinoptilolite, l'autre sur l'extraction de l'ammoniac a travers des membranes hydrophobes microporeuses. Leurs parametres de fonctionnement ont ete determines de maniere a pouvoir maintenir la concentration extra-cellulaire de l'ammoniaque inferieure a 1 mm. Le couplage de ces deux systemes de detoxication a des cultures d'hybridomes a permis le maintien de la concentration extra-cellulaire de l'ammoniaque a des faibles valeurs


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  • Annexes : 113 REF

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