Etude des glycanes pariétaux de Saprolegnia monoica et caractérisation biochimique et immunologique de leurs enzymes de synthèse

par Vincent Bulone

Thèse de doctorat en Sciences. Biologie cellulaire

Sous la direction de Michel Fèvre.

Soutenue en 1992

à Lyon 1 .

Le président du jury était Michel Fèvre.


  • Résumé

    Ce travail a porte sur la purification et la caracterisation des glycosyltransferases de saprolegnia monoica. Des analyses biophysiques (diffraction aux rayons x, diffraction electronique, spectroscopie infra-rouge) ont permis de montrer la presence de chitine granulaire dans la paroi du champignon. Des analyses quantitatives et l'utilisation de polyoxine d ont montre que la chitine ne joue pas un role morphogenetique important. La cellulose parietale de saprolegnia est fibrillaire et faiblement cristalline. Des fractions enrichies en beta 1,3 et beta 1,4 glucane synthases ont ete obtenues par centrifugation des enzymes solubilisees sur gradient de glycerol et piegeage des enzymes par leur produit de reaction. Les analyses en sds-page de ces fractions ont montre la structure oligomerique des glucane synthases. Ces resultats ont ete confirmes par l'obtention d'anticorps monoclonaux anti-glucane synthases. La structure de la beta 1,3 glucane synthase a ete etudiee a l'aide d'anticorps polyclonaux diriges contre les polypeptides caracteristiques de l'enzyme (western-blots, immunoprecipitation et immunomarquage des enzymes associees a leur produit de reaction). Les sequences n-terminales des polypeptides caracteristiques de la beta 1,3 glucane synthase ont ete determinees. Une banque d'adnc du champignon a ete criblee a l'aide de l'un des serums polyclonaux obtenus. Onze clones positifs ont ete isoles

  • Titre traduit

    Study of cell-wall glycans from saprolegnia monoica and biochemical and immunological characterization of their biosynthesis enzymes


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Informations

  • Détails : 1 vol. (165 p.-[59] p. de pl.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 150-162

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
  • Disponible pour le PEB
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