Developpements en chromatographie d'exclusion sterique preparative et en diffusion de la lumiere en vue de l'etude des interactions pectine-calcium en milieu dilue

par MOHAND OUSALEM

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de JEAN PIERRE BUSNEL.

Soutenue en 1992

à Le Mans .


  • Résumé

    Afin d'obtenir des fractions etroites de pectines on a opere sur des solutions diluees en automatisant completement l'appareil de chromatographie d'exclusion sterique preparative afin de gerer sans peine des campagnes de fractionnement d'une semaine qui correspondent a des quantites traitees interessantes. L'ultrafiltration tangentielle permet ensuite de reconcentrer si besoin les fractions obtenues. Cette methodologie a de plus l'avantage d'etre transposable sans aucune modification au fractionnement d'une grande variete d'autres polymeres hydrosolubles. En ce qui concerne la diffusion de la lumiere des techniques de filtration tres soigneuses ont permis de resoudre le probleme des agregats au niveau des solutions de pectines. En mode correlation de photons grace aux multicorrelateurs, on observe une large plage de temps de relaxation et on peut ensuite deconvoluer les correlogrammes et faire apparaitre separement les caracteristiques des macromolecules et celles des agregats. Il en resulte une serie d'information sur les agregats non specifiques qui apparaissent mecaniquement fragiles, et qui peuvent se reformer des qu'il y a perturbation du milieu par changement de temperature ou de concentration. A partir de fractions etroites il a meme ete possible d'isoler des agregats de taille macroscopique visibles sous forme de rubans au microscope optique. Au contraire les agregats pectine-calcium sont plus resistants, colmatent les filtres et ne sont pas disloques lors d'une filtration. Leur taille et largeur de distribution augmentent avec la concentration et le taux de calcium jusqu'a un seuil a partir duquel apparait brusquement une separation de phase. En presence de calcium, il n'a pas ete possible d'isoler des degres d'agregation tres faibles (dimeres, trimeres,. . . ) mais pour des chaines suffisamment longues, on observe un spectaculaire effet de repliement intramoleculaire


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Informations

  • Détails : 149 f
  • Annexes : 167 REF

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  • Bibliothèque : Université du Maine. Service commun de documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.S.1600
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