Etude topographique des sites de fixation du phosphate, du pyrophosphate et de l'ADP sur l'ATPase mitochondriale de coeur de boeuf

par Laurent Michel

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Pierre Vignais.

Soutenue en 1992

à Grenoble 1 .

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  • Résumé

    Les h#+-atpases impliquees dans la chaine d'oxidation phosphorylante sont composees d'un canal a protons (f#0) et d'un secteur hydrophile (f#1) qui contient les sites catalytiques. Cette etude porte sur la structure de sites d'interaction entre f#1 isole de mitochondries de cur de buf et certains de ses ligands par une approche de photomarquage. Le pyrophosphate (ppi) possede trois sites de fixation sur f#1. Un analogue photoactivable du ppi, le (#3#2p)azido-ppi, a ete synthetise et ses caracteristiques de fixation a l'equilibre ont ete etudiees. Les sites occupes par le ppi sont au cur d'un reseau d'interaction avec les autres sites ligands, a une interface entre sous-unites alpha et beta. Sur beta, les sites de fixation sont les residus tyr 311 et tyr 345. Sur alpha, le marquage est porte par les peptides cb3 et cb8. 9. Nous faisons l'hypothese que ces regions peptidiques constituent une zone charniere entre sites catalytiques et non catalytiques. Le fluorure de beryllium est capable d'inhiber f#1 en induisant la formation d'un complexe abortif. Avec deux sites echangeables bloques, ce f#1 inhibe fixe toujours les memes quantites de ppi. Une etude de photomarquage a ete realisee sur cet etat de f#1. L'analogue de phosphate (anpp) se fixe dans la region beta-tyr 311, dont la structure du site est peu modifiee par rapport a la conformation native. La cartographie du site phosphate sur f#1 de chloroplastes a ete realisee et le residu beta-tyr 328 a ete identifie comme porteur du marqueur anpp. Ce residu est homologue de la beta-tyr 311 du f#1-mitochondrial

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Informations

  • Détails : 186 p
  • Annexes : 201 REF

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  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 92/GRE1/0205
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