Embryogenese somatique chez hevea brasiliensis. Multiplication des amas embryogenes et etude de leur developpement en plantules. Mise au point d'une technique de cryoconservation

par PHILIPPE VEISSEIRE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de A. COUDRET.

Soutenue en 1992

à Clermont Ferrand 2 .

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  • Résumé

    L'obtention d'un cal hautement embryogene d'hevea brasiliensis a la structure friable (guerrier, 1992) a permis l'etablissement de suspensions cellulaires embryogenes. Le potentiel embryogene de la souche et le fort taux de multiplication de celle-ci sont conserves que la culture ait lieu en milieu liquide d'induction (mh1 contenant 9 m de 3,4-d, 9 m de bap et 234 mm de saccharose) ou en milieu liquide d'entretien (mh2 contenant 2,25 m de noa, 2,25 m de bap et 58 mm de saccharose). La differenciation des proembryons obtenus dans ces milieux de culture liquides jusqu'au stade de jeunes plantules necessite deux etapes: la premiere est realisee par un apport en acide abscissique faisant evoluer les proembryons en embryons somatiques aux stades cur et torpille. Cette etape peut etre realisee en milieu solide comme en milieu liquide et rend les embryons somatiques aptes a reagir au deuxieme traitement. Il est effectue sur milieu solide par un apport en cytokinines ou en adenine declenchant la production des plantules. Une methode de cryoconservation a egalement ete mise au point dans le but de conserver une souche embryogene jusqu'a la verification de la conformite des arbres regeneres. Cette etude met en evidence que l'association saccharose acide abscissique peut etre utilisee comme cryoprotecteur chez l'hevea brasiliensis. Des mesures de la teneur en eau, de la temperature de fusion de l'eau et du pourcentage d'eau congelable des cellules sont effectuees au cours du temps pour suivre l'effet des differents pretraitements realises afin de preparer les amas cellulaires embryogenes a leur congelation. L'effet tres benefique d'un apport en charbon actif au cours du post-traitement a egalement ete mis en evidence


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  • Détails : 136 P.
  • Annexes : 171 REF.

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