Etude et modelisation du comportement d'electrodes modifiees de carbone destinees a la detection voltammetrique d'activites de proteases immobilisees

par HYACINTHE RANDIAMAHAZAKA

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de J.-M. NIGRETTO.

Soutenue en 1991

à Tours .

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  • Résumé

    La reponse electrochimique d'une electrode a pate de carbone modifiee par adsorption superficielle d'enzyme a ete simulee. Dans le cas traite, on envisage la detection periodique d'un marqueur, libere a la surface de l'electrode d'un substrat contenu en solution. Ce modele predit la nature des parametres qui influencent la reponse cyclovoltammetrique et il indique une procedure permettant leur evaluation a partir des donnees experimentales. Les parametres pertinents sont notamment le coefficient de diffusion du substrat non hydrolyse, la densite superficielle d'enzyme et la constante catalytique heterogene, mis a part les proprietes electrochimiques du marqueur. Ce modele predit qu'une linearisation des cinetiques peut etre obtenue a condition d'affecter les expressions des vitesses par un terme egale a la racine carree du temps de la catalyse. Un tel systeme a ete teste effectivement dans le cas ou l'enzyme adsorbee est la thrombine, une serine protease de la coagulation. Les resultats ont ete obtenus par la mise en uvre de deux substrats specifiques: s-2238 (h-d-phe-pro-arg-pnitroaniline) et s-2497, ne differant que par la nature du marqueur electroactif liberable de la meme sequence tripeptidique. De l'analyse de la reponse, on a pu extraire la densite superficielle de thrombine, la constante apparente de michaelis k'm et la constante heterogene de catalyse enzymatique


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  • Annexes : 110 REF

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