Caractérisation du gène HEXB et étude du rôle des protéines HEXA et HEXB dans la préparation des mésappariements de l'ADN chez les bactéries Streptococcus Pneumoniae

par Marc Prudhomme

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean-Pierre Claverys.

Soutenue en 1991

à Toulouse 3 .

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  • Résumé

    Le systeme hex de reparation des mesappariements corrige les erreurs de replication et agit sur les intermediaires de recombinaison. Le produit du gene hexb est l'une des deux proteines requise pour la reparation des mesappariements par cet organisme. Nous avons determine la sequence nucleotidique de ce gene. La proteine hexb longue de 649 residus est homologue aux proteines mutl de salmonella typhimurium et de escherichia coli ainsi que de pms1 de sacharromyces cerevisiae, elles aussi impliquees dans la reparation des mesappariements. Cette conservation entre les proteines indiquent que celles-ci doivent jouer un role similaire dans le processus de reparation et suggerent que les systemes hex, mut et pms ont evolue a partir d'un ancetre commun. Nous avons montre qu'en depit de l'homologie entre les proteines hexb et mutl, hexa et muts, l'expression des genes hex chez e. Coli ne permet pas de complementer le phenotype mutateur des mutations des genes mutl et muts. Cependant un effet de complementation negative lie a l'expression du gene hexa dans une souche sauvage de e. Coli a ete mis en evidence, conferant un phenotype mutateur equivalent a celui d'une sourche mut#. Une augmentation du nombre de copies du gene muts permet d'abolir cet effet de complementation negative suggerant que cet effet est lie a une competition de la proteine hexa vis-a-vis de son homologue muts. Afin de comprendre le mode d'action de la proteine hexa chez e. Coli nous avons procede a une serie d'essais de reparation in vitro en utilisant des extraits proteiques. Les extraits obtenus a partir de cultures cellulaires ayant exprime le gene hexa sont deficients pour la reparation d'un mesappariement in vitro. L'activite de reparation est restauree par l'ajout de la proteine mutl purifiee et non de muts. Ce resultat suggere une interaction abortive entre les proteines hexa et mutl. Nous avons de plus mene a bien la purification de la proteine hexa et montre que cette proteine ralentit les fragments d'adn porteurs d'un mesappariement g/t


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Informations

  • Annexes : 168 REF

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  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1991TOU30180
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