Purification, caracterisation et expression du recepteur cellulaire des echovirus

par ANDRE DIEUDONNE MBIDA

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de O. G. GAUDIN.

Soutenue en 1991

à SAINT ETIENNE .

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  • Résumé

    Les recepteurs cellulaires jouent un role important dans la pathogenese virale. Les informations concernant la nature et la structure du recepteur des echovirus (ev) sont actuellement tres peu connues. A partir d'un extrait membranaire de cellules kb utilise comme immunogene, nous avons produit un anticorps monoclonal (acm 143) qui inhibe l'effet cythopatique (ecp) de l'ev 11 sur differentes lignees cellulaires issues de primates. La penetration de tous les ev a l'exception des ev 22 et 23, et du coxsackievirus a9 est aussi inhibee tandis que celle de plusieurs autres picornavirus n'est pas affectee. Par une technique d'immunoaffinite utilisant l'acm 143 comme ligand, nous avons purifie a partir des extraits membranaires de cellules kb, une glycoproteine d'environ 44 kda. Cette glycoproteine (gp 44) ne contient pas de ponts disulfures et les residus sucres sont composes de d mannose et/ou d glucose. Des anticorps polyclonaux de lapins immunises par la gp 44 inhibent aussi la penetration de l'ev 11 sur les lignees cellulaires de primates comme le fait l'acm 143. Par une technique de western-blot, nous avons detecte la gp 44 dans les extraits membranaires de lignees de primates sensibles aux infections a ev, mais pas dans ceux de lignees d'autres orifines. De facon similaire, nous avons montre par l'analyse en cytofluorimetrie que l'acm marque a la fluoresceine ne se fixe pas sur les cellules d'origine bovine, canine et de lapin mais se fixe specifiquement sur les lignees cellulaires humaines et simiennes. Ces resultats suggerent que la plupart des ev utilisent un recepteur commun pour l'absorption et la penetration dans les cellules sensibles


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  • Annexes : 222 REF

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