Utilisation d'hybrides somatiques pour etudier la regulation de l'expression des genes de la beta globine et de l'insuline humaines

par CORINNE BESNARD

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de JACQUES JAHI.

Soutenue en 1991

à Paris 7 .

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  • Résumé

    L'etude des mecanismes qui interviennent dans la regulation de l'expression des genes de la beta globine et de l'insuline humaines a ete entreprise en utilisant la combinaison de deux techniques: la transfection et l'hybridation somatique. Le gene de la beta globine. Le gene de la beta globine humaine, avec 2,3 kb en 5 et 0,5 kb en 3 de sequences flanquantes, est transcrit lorsqu'il est introduit par transfection dans des cellules de teratocarcinome. Cette expression ectopique est maintenue apres fusion des cellules transfectees avec des fibroblastes. Ce travail suggere que des sequences necessaires pour une expression tissu-specifique du gene de la beta globine ne sont pas comprises dans le fragment que nous avons utilise. Le gene de l'insuline. L'expression du gene de l'insuline est eteinte dans des hybrides realises entre des cellules d'insulinome de rat (cellules rin) qui synthetisent de l'insuline et des fibroblastes. Cette expression est retablie apres elimination de materiel genetique provenant du parent fibroblaste. Ces resultats suggerent que les fibroblastes contiennent des facteurs regulateurs negatifs de l'expression du gene de l'insuline. D'autre part, un gene rapporteur gpt mis sous controle des sequences regulatrices 258 pb/+241 pb du gene de l'insuline humaine a ete introduit par transfection dans le genome des cellules rin. Ce gene est exprime dans les cellules transfectees et son expression est abolie apres que les cellules aient ete fusionnees a des fibroblastes. Ce resultat semble indiquer que les sequences impliquees dans la regulation negative du gene de l'insuline humaine sont comprises dans le fragment 258 pb/+241 pb du gene


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  • Annexes : 400 REF

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  • Cote : TS1991
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