Contribution à l'optimisation d'un prototype de polarisation de fluorescence adapté à des dosages en biologie cellulaire et clinique

par Daniel Dorn

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Gérard Prieur.

Soutenue en 1991

à Nancy 1 .


  • Résumé

    La polarisation de fluorescence suscite un grand intérêt. Des applications ont été développées en biologie cellulaire et clinique. Cette méthode rend compte de la faculté de rotation de sondes fluorescentes dissoutes dans des milieux biologiques et donne ainsi des informations sur la cohésion de leur environnement immédiat. L'objet de ce travail a été l'étude d'un système instrumental permettant des déterminations de faibles émissions de fluorescence a la fois en biologie cellulaire et clinique. La partie optique du système, un montage en T, a été utilisé. Le système a été prévu pour des mesures avec des sondes fluorescentes présentant des caractéristiques spectroscopiques différentes. Les parties photodétection, amplification et traitement des signaux ont été particulièrement étudiés. Un programme informatique a permis de tester la sensibilité et la reproductibilité des résultats. En biologie cellulaire, les tests ont été effectués sur des populations lymphocytiques de souris marquées avec des acides (n-(9-anthroloxy)) stéariques. En biologie clinique, les essais ont porté sur un dosage reposant sur l'interaction gélatine-fibronectine. Le marqueur utilisé étant l'isothiocyanate de fluorescéine (fitc). Ces essais ont montre qu'en ce qui concerne la sensibilité l'objectif prévu était pratiquement atteint. Par contre, une modification du traitement des signaux devrait permettre d'augmenter sensiblement la reproductibilité des résultats

  • Titre traduit

    Optimisation of fluorescency polarisation prototype to be used in biological and clinical analysis


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Informations

  • Annexes : 61 ref.

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