Mise en évidence dans les extraits rénaux et dans le surnageant de cellules stromales médullaires d'une nouvelle activité érythropoïétique : caractérisation de cette activité et étude de son rôle physiologique

par Julien Royet

Thèse de doctorat en Sciences. Biologie cellulaire

Sous la direction de Jean-Paul Blanchet.

Soutenue en 1991

à Lyon 1 .

Le président du jury était Jean-Paul Blanchet.


  • Résumé

    Chez les vertebres, l'erythropoiese resulte de la differenciation d'une sequence de progeniteurs issus de la cellle souche hematopoietique pluripotente. Les techniques de culture clonale ont permis la caracterisation de trois types de progeniteurs erythropoietiques: la bfu-e precoce (bfu-ep), la bfu-e tardive (bfu-et) et la cfu-e. La differenciation de ces progeniteurs est controlee in vitro par deux principaux types de regulateurs: 1) les molecules a activite bpa (burst promoting activity) qui supportent la proliferation des bfu-e. Les principales cytokines a activite bpa sont l'il3, l'il4, l'il9, le gm-csf, l'epa, l'hilda/lif et l'activine; 2) l'erythropoietine (epo) qui assure la differenciation des cfu-e et dont la presence est egalement necessaire a la differenciation terminale des bfu-e. Dans les cultures a long terme de moelle osseuse, l'erythropoiese reste bloquee, en l'absence d'apport exogene d'epo, au stade de la bfu-et. L'addition d'epo aux cultures a long terme induit la differenciation des progeniteurs erythroides et la synthese de molecules capables de stimuler la croissance des bfu-et en milieu semi-solide. Ces molecules ont ete appelees mbpa (mature burst promoting activity) en raison de leur specificite d'action sur les bfu-et (bfu-e matures en anglais). Nous avons montre que le mbpa est stocke dans les cellules stromales de cultures a long terme et que son emission dans le surnageant est liee a la stimulation des cultures a long terme par l'epo. Afin de caracteriser les molecules a la base de cette activite, nous avons immortalise une lignee de cellules stromales qui produit de maniere constitutive le mbpa: la lignee n. A partir du milieu conditionne par cette lignee, nous avons demontre que l'activite bpa observee etait due a une ou plusieurs proteines glycosilees et fortement hydrophobes. Par chromatographie de gel-filtration, nous avons determine la masse moleculaire apparente des molecules a activite bpa. On retrouve trois pics d'activite dans des fractions de chromatographie correspondant a des molecules de 100-130, 30-40, et 10-15 kda. Nous avons egalement detecte dans les extraits renaux, une activite bpa partageant de nombreuses caracteristiques avec le mbpa. Les activites bpa stromale et renale ont la meme cellule cible (la bfu-et) et la masse moleculaire apparente des molecules a activite bpa est identique dans les deux sources. Par ailleurs, comme cela a deja ete decrit pour l'erythropoietique, le taux de mbpa renal varie en fonction des etats erythropoietiques de l'animal. Il est augmente en cas d'anemie et diminue lors d'une forte polyglobulie. La disparition du mbpa renal endogene chez la souris polyglobulique s'accompagne d'une accumulation spectaculaire des bfu-et dans la rate et la moelle osseuse de l'animal traite. La differenciation de ces progeniteurs semble totalement dependante de la presence de mbpa. Le mbpa renal est egalement capable de stimuler l'erythropoiese dans les cultures a long terme. Enfin, l'injection de mbpa renal provoque une augmentation transitoire mais importante de la population des progeniteurs erythropoietiques spleniques du receveur. Nous avons pu apporter la preuve que l'activite bpa detectee dans les cellules stromales et dans les extraits renaux ne pouvait etre attribuee a aucune des cytokines actuellement connues. L'ensemble de ces resultats nous conduisent a penser que le mbpa pourrait etre un facteur erythropoietique original intervenant dans la regulation de l'erythropoiese in vivo

  • Titre traduit

    Characterisation of a novel burst promoting activity detected in kidney cell lysates and in supernatants of stromal cell lines


  • Pas de résumé disponible.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (93 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f. 70-92

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
  • Disponible pour le PEB
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.