Identification, caractérisation moléculaire et valeur diagnostique d'un épitope protéique immunogène de l'antigène 5 d'Echinococcus granulosus

par Mustapha Chamekh

Thèse de doctorat en Immunologie

Sous la direction de André Capron.

Soutenue en 1991

à Lille 1 .


  • Résumé

    L'hydatidose est une maladie parasitaire due au développement, chez l'homme et le bétail, de la larve d'un cestode: Echinococcus granulosus. Le diagnostic précoce de cette parasitose est important pour le choix du traitement. Parmi les antigènes du liquide hydatique utilisé pour l'immunodiagnostic, l'antigène 5 est reconnu spécifiquement par une grande proportion de sérums humains hydatiques. Dans le but de définir et de produire les déterminants antigéniques spécifiques d'E. Granulosus, nous avons caractérisé l'antigène 5 en utilisant un anticorps monoclonal spécifique et des sérums humains hydatiques. Les analyses en Western blot et en immunoprécipitation nous ont permis de déduire que l'antigène 5 correspond à une molécule de 64 kDa composé de deux sous-unités de 37 et 22 kDa. Dans un test de compétition radioimmunologique, l'Ac monoclonal inhibe spécifiquement la fixation des sérums humains hydatiques à l'Ag 5, suggérant l'intérêt diagnostique de(s) épitope(s) cible(s). La déglycosylation et la délipidation des Ag hydatiques ainsi que l'immunoprécipitation des produits de traduction de l'ARN messager des protoscolexes d'E. Granulosus nous ont révélé la nature protéique de l'épitope reconnu. L'Ac monoclonal a été ensuite utilisé pour cribler une banque d'ADN complémentaire de l'ARN messager. Deux clones (Eg6 et Eg14) ont été isolés et caractérisés. La protéine recombinante du clone Eg6 est reconnue aussi bien par l'Ac monoclonal que par des sérums humains hydatiques précipitant l'Ag 5. La comparaison des séquences des clones Eg6 et Eg14 révèle une faible homologie. Par contre, l'analyse de la répartition des résidus hydrophobes montre que les deux protéines ont une organisation a-hélicoïdale et qu'elles possèdent une zone conformationnelle commune, formée par la juxtaposition d'acides aminés éloignés dans la structure primaire. Cette homologie topographique a été mimée par un peptide synthétique organisé en a-hélice. Testé en ELISA, ce peptide réagit spécifiquement avec des anticorps, particulièrement de classe IgE, de différents patients atteints d'hydatidose. Ces résultats indiquent le grand intérêt de ce peptide comme antigène standard pour le diagnostic et le pronostic de l'hydatidose

  • Titre traduit

    Identification, molecular characterization and diagnostic value of an immunogenic protein epitope of Echinococcus granulosus antigen 5


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Informations

  • Détails : 1 vol. (154 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 133-150

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université des sciences et technologies de Lille (Villeneuve d'Ascq, Nord). Service commun de la documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 50376-1991-146
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