Transfection in vitro et in vivo dans les cellules animales de plasmides encapsulés dans des liposomes et induction de l'expression de gènes hétérologues controlés par le promoteur de choc thermique hsp70

par Hanwei Cao

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Prudent Padieu.

Soutenue en 1991

à Dijon .


  • Résumé

    Huit différents types de culture de cellules animales ont été transfectés à l'aide d'une méthode fondée sur l'encapsulation des plasmides recombinés dans les liposomes en utilisant soit des lignées établies, soit des cultures primaires. De plus, la transfection a été réalisée in vivo c'est-à-dire chez le rat. En même temps, l'étude a porté sur le système d'expression génétique inductible par la chaleur contrôlé par le promoteur du gène de la protéine de choc thermique hsp70 de l'homme ou celui de la drosophile. Les résultats expérimentaux montrent que sous l'effet d'un choc thermique les cellules expriment des gènes respectivement bactériens, viraux ou humains contrôlés par le promoteur hsp70. Dans une condition optimale d'induction thermique, le niveau d'expression génétique a été augmenté jusqu'a un millier de fois par rapport au témoin. Après sélection, cinq lignées de cellules transfectées stables ont été obtenues. Une lignée transformée de fibroblastes hépatiques de rat, la lignée IIB, résultant d'une co-transfection par les plasmides pEJ et p17HBN, portant respectivement les gènes de l'oncogène Ha-ras et de l'hGH, sécrétait d'une façon continue reproductible, 3000 ng à 7000 ng d'hGH par 10 puissance 6 cellules par 24 h selon les conditions de culture. Ces cellules transformées par co-transfection de l'oncogène Ha-rasEJ ont produit une tumeur transplantable chez la souris nude apres injection sous-cutanee de 10 puissance 6 cellules. Dans le cas de la transfection in vivo, les gènes utilisés ont été exprimés chez des rats.

  • Titre traduit

    In vitro and in vivo transfection in animal cells of liposome-encapsulated plasmids and inducible expression of heterologous genes controled by the hsp70 heat shock promoter


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Informations

  • Détails : 1 vol. ([12]-160 f.)
  • Annexes : Bibliographie f. 144-160, 200 réf.

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  • Bibliothèque : Université de Bourgogne. Service commun de la documentation. Section Sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TDDIJON/1991/32
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