Modulation de l'activite de cyclodextrine glycosyltransferases en presence de polyethylene glycol

par MARIE-FRANCOISE DELBOURG

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean-Noël Barbotin.

Soutenue en 1991

à Compiègne .

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  • Résumé

    La cyclodextrine glycosyltransferase (cgtase) synthetise des cyclodextrines (cds) a partir d'amidon. La production de cyclodextrines peut etre augmentee en ajoutant dans le milieu reactionnel des solvants ou des alcools tels que: le bromobenzene, l'ethanol, le decanol. . . Aucun depresseur de l'activite de l'eau genre polyol n'a encore ete utilise avec la cgtase. Les polyols utilises avec l' amylase permettent d'obtenir une modification de leur comportement enzymatique. Les cgtases et alpha amylases possedent trois domaines structuraux assez semblables. Nous nous sommes demande si la presence de polyols dans le milieu reactionnel en presence de cgtase influencerait: la specificite de production de cyclodextrines alpha, beta ou gamma; la thermostabilite de la cgtase; la production de cyclodextrines; induirait une inhibition de l'enzyme ou bien d'autres phenomenes. Deux cgtases d'interet industriel ont ete etudiees en presence de polyols et plus particulierement du polyethylene glycol (peg). Ces deux enzymes ont ensuite ete immobilisees et l'activite presente sur les supports d'immobilisation dosee avec ou sans peg. La presence de mannitol, glycerol, et de polyethylene glycol dans le milieu reactionnel permet d'augmenter la production de cyclodextrines pour les deux cgtases et protege l'une d'elle contre la thermodenaturation. L'hypothese la plus probable concernant l'augmentation de production de cyclodextrines concerne les reactions d'hydrolyse des cyclodextrines par la cgtase. En effet le peg structure et piege les molecules d'eau, celle-ci n'est donc plus disponible pour les reactions d'hydrolyses, (notamment celle des cyclodextrines) et les reactions catalysees par la cgtase sont plutot tirees vers la synthese de cds


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