Etude du contrôle de la prolifération cellulaire chez Saccharomyces Cerevisiae : isolement et étude d'un variant du plasmide 2mum : sélection et caractérisation de mutants thermosensibles

par Philippe Neuville

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Michel Aigle.

Soutenue en 1991

à Bordeaux 2 .

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Résumé

Cette these se compose de deux parties: la premiere approche a consiste a utiliser un melange d'oligonucleotides en vue de cloner le gene de structure d'une proteine qui fixe l'stradiol chez s. Cerevisiae. Cette approche a abouti au clonage du gene rep1 du plasmide 2 microns de la levure, qui ne code pas pour la proteine fixant l'stradiol. La sequence du gene clone est tres differente de celle qui avait prealablement ete publiee pour un autre variant du plasmide 2 microns. Cette divergeance est significative d'une importante evolution intraspecifique. La seconde approche a porte sur la selection de mutants thermosensibles affectes pour la phase stationnaire. Trente six mutants se repartissant en quatre groupes de complementation ont ete selectionnes. Dans les conditions non permissives, ces mutants s'arretent dans la phase g1 du cycle cellulaire. Le gene affecte chez l'un de ces mutants a ete clone et sequence. Il code pour une enzyme de la voie de biosynthese de la proline. Il s'agit du gene pr03, qui code pour la pyrolline-5-carboxylate reductase

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