Approche immunologique de l'etude de deux proteines de la mitochondrie : 1. etude de la topologie et des relations structure-fonction de la d-3-hydroxybutyrate deshydrogenase a l'aide d'anticorps monoclonaux. 2. identification de certaines sous-unites du complexe pyruvate deshydrogenase comme antigenes de la cirrhose biliaire primitive

par PASCALE ADAMI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Norbert Latruffe.

Soutenue en 1991

à Besançon .

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  • Résumé

    1. La d-3-hydroxybutyrate deshydrogenase (bdh) est une enzyme specifiquement activable par la phosphatidylcholine (pc). Par western blot, dot blot, immunoprecipitation, test elisa en competition, et coupures proteolytiques, nous avons teste la specificite de 7 anticorps monoclonaux (mac) pour la bdh, la reactivite croisee des mac pour l'enzyme des 2 especes rat et buf; nous avons determine le type d'epitope (sequentiel ou conformationnel) et localise certains dans la sequence primaire (dont un a l'extremite c-terminale), et par rapport a la surface ou a l'interieur de la proteine native. Nous avons montre que pc dans l'environnement phospholipidique de la bdh modifie le profil proteolytique de l'enzyme et notamment protege l'extremite c-terminale. Celle-ci semble etre indispensable a l'insertion de l'apoenzyme dans la bicouche mais non indispensable a la stabilite du complexe bdh-phospholipides preforme avant coupure. 2. Nous avons identifie, par western blot sur 34 serums, les differents antigenes mitochondriaux de la cirrhose biliaire primitive, maladie autoimmune caracterisee par des auto-anticorps anti-mitochondries. La reactivite des ac auto-immuns sur les sous-unites du complexe multienzymatique pyruvate deshydrogenase purifie a montre que 3 de ses sous-unites sont antigenes. Aucune correlation n'a pu etre trouvee entre les differents profils reconnus par les serums et le sexe des patients, les classes et les sous-classes des ac, l'existence ou non d'un traitement particulier, la greffe d'un foie sain


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  • Annexes : 157 REF

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