Expression transcriptionnelle du gène SRP1 de Saccharomyces cerevisiae : caractérisation d'une séquence intragénique cis-activatrice et implication du facteur général de transcription TUF/RAP1/GRF1

Transcriptional expression of the SRP1 gene of saccharomyces cerevisiae: characterization of a cis-activating intragenic sequence and involvment of the general transcriptional factor TUF/RAP1/GRF1

• Auteur / Autrice : Emmanuelle Fantino
• Direction : Guy Lauquin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et microbiologie
• Date : Soutenance en 1991
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences

Mots clés

Mots clés contrôlés

Saccharomyces cerevisiae

Transcription génétique

Résumé

Ce memoire decrit un exemple original de regulation de l'expression genique au niveau transcriptionnel, dans la levure saccharomyces cerevisiae. Le gene srp1 est efficacement transcrit et cette transcription est regulee en fonction du substrat et/ou de la phase de croissance. L'utilisation de la technique de retardement de migration a permis de mettre en evidence in vitro une interaction proteine-adn specifique impliquant une region de 33 pb situee en aval du promoteur, dans la region codante du gene srp1, et un facteur proteique specifique et abondant. Le role essentiel de la sequence cible de l'interaction proteine-adn dans l'expression transcriptionnelle du gene srp1 a ete demontre in vivo par l'etude d'une souche de levure mutante portant une deletion de la region intragenique de 33 pb au locus srp1 chromosomique obtenue par transformation integrative. Alors que dans cette souche l'expression transcriptionnelle des genes situes en aval du gene srp1 n'est pas effectuee, l'abondance des arnm srp1 est fortement diminuee. La stabilite des armm srp1 n'est pas modifiee: la deletion de la region de 33 pb dans la region codante du gene srp1 est sans effet lorsque l'expression de ce gene est placee sous le controle d'un promoteur de levure different. Le facteur proteique reconnaissant specifiquement l'element activateur intragenique a ete identifie au facteur tuf/rap1/grf1. En effet, l'element de 33 pb presente des similitudes de sequence avec le site consensus de fixation de ce facteur. La determination precise de la sequence d'adn impliquee dans l'interaction, des experiences de competition pour la fixation in vitro de la proteine ainsi que la masse moleculaire de la proteine purifiee ont confirme que ce facteur est identique au facteur general de transcription tuf/rap1/grf1