Etude stéréologique des compartiments membranaires dans les terminaisons nerveuses de l'éminence médiane superfusée in vitro

par Frédérique Soulié

Thèse de doctorat en Neurosciences

Sous la direction de ALFREDO ZAMORA.

Soutenue en 1991

à Aix-Marseille 1 .


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  • Résumé

    Les processus d'exo-endocytose provoquent des modifications dans les cytomembranes des terminaisons nerveuses liees aux microfilaments et aux microtubules. Le but de ce travail est de quantifier ces changements et d'evaluer le role joue par le cytosquelette. Nous utilisons des drogues perturbant le recyclage membranaire dans les terminaisons nerveuses de l'eminence mediane superfusee in vitro. L'analyse des resultats est realisee selon les principes de stereologie de weibel. La proportion volumique (vv) des microvesicules (mv), des vesicules granulaires (bg) et des vacuoles pleomorphes (vp) est determinee, ainsi que la densite numerique des vp. Apres superfusion en milieu standard (ms) se distribuent principalement selon deux populations, l'une au centre de l'axoplasme et l'autre pres de l'axolemme. L'application de potassium entraine une baisse de vv(mv) associee a une augmentation des parametres concernant les vp de 50% chacun. Les mv restantes se repartissent a une distance de l'axolemme comprise entre 300 et 360 nm. La depolymerisation des microfilaments par les cytochalasines b ou d produit un tableau comparable au potassium pour les mv. Mais vv(vp) ne varie pas et l'application ulterieure de potassium augmente de 70% ce paramaetre. Les mv restantes dans le cytoplasme sont surtout localisees pres de l'axolemme, phenomene accentue par la stimulation potassique. L'addition de demecolcine permet d'evaluer le role des microtubules dans ces processus. La stimulation concomitante augmente vv(mv) et declenche la liberation des vg sans variation de vv(vp). Si le tissu est superfuse en ms apres la stimulation potassique, la recuperation est partielle puisque vv(mv) est inferieure aux controles tandis que vv(vp) reste elevee. L'addition de cytochalasine avant, pendant ou apres la stimulation potassique n'empeche pas la recuperation des mv mais vv(vp) est inchangee. Les vg sont sensibles a la periode d'application de la drogue. Ces resultats suggerent qu'il existe deux types de liberation ayant une sensibilite et un decours differents. Il semble y avoir deux populations distinctes de mv par leur localisation et leur implication fonctionnelle. Le recyclage membranaire a probablement lieu a un autre niveau de la terminaison. Il n'est pas assure totalement par les vp, les mecanismes seraient differents pour les deux types de vesicules. L'integrite des elements du cytosquelette est necessaire aux processus d'exo-endocytose

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  • Annexes : Bibliogr.: f.160-186

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