Contribution a l'identificatin des sequences virales impliquees dans la pathogenicite du virus des nervures jaunes et necrotiques de la betterave (bnyvv) : apport de la transcription in vitro et de la mutagenese dirigee

par Isabelle Jupin

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées

Sous la direction de GERARD JONARD.

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Le virus de nervures jaunes et necrotiques de la betterave (ou bnyvv) est l'aent pathogene responsable de la rhizomanie. Son genome est constitue par 4 molecules de rna simple brin de polarite positive, cappees en 5 et polyadenylees en 3. L'etude des strategies d'expression utilises par les rna 1 et 2 de bnyvv nous a permis de mettre en evidence un mecanisme d'initiation interne et la synthese de rna subgenomiques. Par la suite, nous avons obtenu des transcrits infectieux correspondant aux rna 3 et 4. L'analyse de leur devenir dans les plantes infectees a permis de caracteriser les deletions spontanees qui affectent frequemment les rna 3 et 4 dans des conditions d'inoculatin mecanique et a permis de detecter un rna subgenomique du rna 3. Par mutagenese dirigee, nous avons ensuite modifie le rna 3 et montre que les sequences necessaires a la replication sont localisees dans les 300 premiers et les 70 derniers nucleotides. Ceux-ci peuvent etre replies en une structure secondaire conservee entre les 4 rna de bnyvv qui constitue tres probablement un signal de reconnaissance pour la replicase. Les 300 premiers nucleotides renferment egalement le site d'initiation de l'encapsidation. Ces sequences (5 et 3 terminales sont par ailleurs suffisantes pour permettre la replication et l'encapsidation de genes etrangers dans la plante. La sequence polyadenylee est indispensable a l'infectivite des transcrits, supprimee par mutagenese, elle reapparait spontanement au cours de la multiplication des transcrits dans la plante, accompagnee par une petite sequence oligo u d'origine inconnue. Par ailleurs, nous avons demontre que la proteine p25 codee par le rna 3 est responsable du caractere jaune des lesions tandis qu'une deuxieme pourrait etre responsable de l'effet necrogene de certains mutants

  • Titre traduit

    Identification of viral sequences implicated in the pathogenicity of beet necrotic yellow vein virus: use of in vitro transcription and site-directed mutagenesis


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  • Annexes : 281 REF

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  • Cote : Th.Strbg.Sc.1990;751
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