Isolement d'adn complementaire codant pour la choline acetyltransferase, outils pour l'etude de la regulation de l'expression du gene

par SYLVIE BERRARD

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jacques Mallet.

Soutenue en 1990

à Paris 11 .

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  • Résumé

    La choline acetyltransferase (chat) catalyse la biosynthese de l'acetylcholine et constitue un marqueur specifique des neurones cholinergiques. Un adnc codant pour la chat de porc a tout d'abord ete identifie par hybridation avec des oligonucleotides correspondant a la sequence de l'extremite n-terminale de la proteine. L'arnm correspondant genere une activite chat apres traduction in vitro, ce qui prouve l'identite du clone d'adnc selectionne. Ce clone a permis d'isoler par hybridation croisee un adnc contenant la sequence codante complete de la chat de rat. Les sequences completes de la chat de porc et de la chat de rat presentent 90% d'homologie. Toutefois, l'homologie n'est que de 50% avec la chat de drosophila m. . Cependant, des domaines plus fortement conserves ont ete identifies dans les sequences de la chat des trois especes. La modulation de l'expression de l'arnm-chat a ete etudiee par northern, d'une part dans le striatum de rat apres lesion de la voie dopaminergique nigro-striee, d'autre part dans des cultures de neurones sympathiques de rat nouveau-ne, en presence ou en l'absence d'un facteur de differenciation cholinergique. L'analyse de l'expression de l'arnm-chat a egalement ete initiee au niveau cellulaire par hybridation in situ dans le systeme nerveux central. Enfin, plusieurs clones genomiques contenant la sequence de l'extremite 5 du gene chat ont ete isoles. Un fragment de 1902 pb, dont l'extremite 3 correspond aux 144 premiers nucleotides en 5 de l'adnc-chat, a sequence. L'analyse des sequences promotrices du gene, probablement contenues dans ce fragment, est en cours. Le gene chat humain a ete localise sur le chromosome 10 (en qii,2)


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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
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  • Cote : TH2014-010102
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