Etude et caracterisation du gene cdc33 de saccharomyces cerevisiae implique dans le controle du start de division cellulaire (premiere partie). Mise au point d'un systeme de transcription in vitro dependant de l'arn polymerase b chez saccharomyces cerevisiae. Applications (seconde partie)

par Jean-Michel Verdier

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de MICHEL JACQUET.

Soutenue en 1990

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Premiere partie: le mutant cdc33 de s. Cerevisiae appartient aux genes de la classe ii du start de division cellulaire. Le produit de ce gene est requis pour l'initiation d'un nouveau cycle de division. La voie de signalisation de l'ampc est un des elements majeurs controlant le start. Nous avons clone le gene cdc33 par complementation d'un mutant cdc33-1 thermosensible. Il est transcrit en un arnm abondant de 900 nucleotides. Il est essentiel pour la sporulation. Un mutant cdc33-1 est capable d'entrer dans l'etat de repos et le pool intracellulaire d'ampc n'est pas modifie par passage a temperature restrictive. Sachant que la mutation cdc33-1 n'est pas supprimee par les autres elements connus de la cascade ampc, ces resultats suggerent que le gene cdc33 n'interfere pas avec la voie de signalisation de l'ampc. Seconde partie: nous avons developpe un systeme de transcription in vitro dependant de l'arn polymerase b chez s. Cerevisiae. Ce systeme est base sur l'obtention d'extraits nucleaires grace a l'activite lyticase produite par o. Xanthineolytica. Nous avons montre que ces extraits nucleaires sont capables de transcrire efficacement et specifiquement in vitro a partir d'une matrice sans g contenant le promoteur majeur tardif de l'adenovirus (ad2mlp). De plus, nous avons montre avec ce systeme que l'homologue de levure du facteur uef humain stimule la transcription a partir de l'ad2mlp suggerant que les mecanismes de la transcription sont conserves chez les eucaryotes


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  • Cote : TH2014-009938
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