La 25-oligoadenylate synthetase de 100 kda de placenta humain : purification, caracterisation et etude de sa fonction biologique

A novel 100 kda form of 25-oligoadenylate synthetase of human placenta : purification, characterization and study of its biological functions

• Auteur / Autrice : GUIYI ZHANG
• Direction : MING NGUY THANG
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Cette these porte sur l'etude de la 25-a synthetase de cellules normales de placenta humain en se fondant sur la purification, la caracterisation de cette enzyme. La 25-a synthetase de 100 kda, la forme peu etudiee a ce jour, a ete purifiee a l'homogeneite avec une quantite importante. Les proprietes physico-chimiques de la 25-a synthetase de 100 kda ont montre qu'elle n'est pas une proteine globulaire, mais de forme allongee. L'etude de ses proprietes catalytiques montre que cette enzyme ressemble a son homologue de cellules en culture traitees par l'ifn par son km, sa dependance en mg#2#+ et son mecanisme d'elongation pour la synthese des chaines 25-a. Le mecanisme d'activation de la 25-a synthetase de 100 kda par les arn db a ete demontre par une etude sur le site(s) actif(s): les arn db ne sont pas necessaires pour l'ouverture du site accepteur, mais absolument necessaires pour l'ouverture du site donneur ou/et la formation de liaison phosphodiester. Grace aux anticorps polyclonaux et monoclonaux diriges contre la 25-a synthetase de 100 kda, trois formes d'enzyme (115, 100 et 46 kda) ont ete identifiees et localisees dans les cellules de trophoblaste de placenta humain. Une variation du taux de la 25-a synthetase placentaire au cours du developpement foetal a ete montree. Plusieurs sondes oligonucleotides ont ete synthetisees d'apres la sequence partielle d'acide amine que nous avons analysee, afin de cloner son gene