Contribution a l'etude des canaux ioniques de la membrane basolaterale de l'anse de henle du rein de souris : caracterisation par la technique du patch-clamp

par MARC PAULAIS

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de TAKIS ANAGNOSTOPOULOS.

Soutenue en 1990

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Le segment large de la branche ascendante de l'anse de henle du nephron de mammifere est un site majeur de la regulation de l'excretion de l'eau et des electrolytes. La reabsorption transmurale de chlorure de sodium s'effectue selon un schema connu, faisant intervenir des voies de transport diffusionnelles. L'identification de certains canaux ioniques de la membrane basolaterale de ce segment et la determination de leurs mecanismes de regulation ont ete realises. Nous avons caracterise: 1) un canal cationique, de faible conductance, ne discriminant pas le sodium du potassium, dont la presence n'avait pas ete anticipee par les techniques electrophysiologiques traditionnelles. Son activation doit modifier la difference de potentiel a travers la membrane basolaterale, moduler les flux diffusionnels trans-cellulaires, et finalement influencer l'absorption de chlorure de sodium. Il est active par le calcium libre cytoplasmique et inhibe par les nucleotides a base adenine. Sa sensibilite au calcium cytoplasmique est telle que celui-ci represente vraisemblablement l'activateur majeur du canal. A l'inverse, sa sensibilite aux nucleotides predit son inactivite in situ, quelle que soit la concentration de calcium physiologiquement envisageable. Cette double regulation suggere que l'activation du canal par une augmentation du calcium cytoplasmique necessite une diminution simultanee de sa sensibilite aux nucleotides; 2) un canal chlore. De conductance ohmique, il est permeable aux anions et exclut les cations, peu sensible a la difference de potentiel imposee, et insensible au calcium libre cytoplasmique. Son activation necessite une augmentation de l'ampc, mais en des termes suggerant l'intervention d'un autre facteur de regulation de son activite. Ce canal confirme la presence d'une voie diffusionnelle basolaterale au chlore necessaire a sa diffusion peritubulaire, et son activation par l'ampc est en faveur de son im


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  • Annexes : 148 REF

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