Clonage d'une séquence d'ADN de foie humain qui rétablit l'expression des fonctions hépatiques dans une cellule dédifférenciée d'hépatome de rat

par Kim Heng NG-Bonaventure

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean Deschatrette.

Soutenue en 1990

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Les cellules d'un clone variant dedifferencie de la lignee h4iiec3 d'hepatome de rat ont ete transfectees par electroporation avec de l'adn genomique de foie humain. Les produits de transfection ont ete cultives dans un milieu selectif sans glucose dans lequel seules les cellules exprimant deux activites enzymatiques de la voie de la gluconeogenese (pepck et fdpase) peuvent se multiplier. Des clones de cellules revertantes ont pu etre isoles (frequence-10##8) et l'analyse des arn de ces clones a demontre le retablissement de l'expression de toute une serie de fonctions hepatiques. L'utilisation comme sonde moleculaire d'une sequence alu humaine clonee a permis de mettre en evidence dans au moins 4 clones revertants, l'existence d'une sequence d'adn humain de 4,3 kb, circulaire, episomale. Une correlation entre l'expression des fonctions hepatiques et l'introduction de cette sequence d'adn clonee (half1) dans les cellules a ete etablie. Il a ete montre que half1, present dans de l'adn de haut poids moleculaire du foie humain, est specifiquement implique dans le processus de reversion et n'est pas responsable du maintien de l'etat differencie acquis par les cellules. La stabilite de cet etat differencie apparait lie a un caractere structural de la chromatine transmis chromosomiquement a travers les generations cellulaires. Enfin, une stricte correlation entre l'absence du pouvoir tumoral des cellules variantes et leur etat dedifferencie a ete etabli. Un modele integrant les caracteristiques de half1 et l'ensemble des informations collectees sur ce systeme biologique est propose

  • Titre traduit

    Cloning of a human liver dna sequence (half1) that restores the expression of differentiated functions to a dedifferentiated rat hepatoma cell


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  • Annexes : 116 REF

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  • Cote : TS (1990) 071
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