Etude de l'heterogeneite genetique du deficit en uridyltransferase. Recherche de complementation interallelique par utilisation des techniques de fusion cellulaire

par NOMAN KADHOM

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de MARTHE GAUTIER.

Soutenue en 1990

à Paris 7 .

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  • Résumé

    La galactokinase (galk) et l'uridyltransferase (galt) assurent les deux premieres etapes du metabolisme du galactose. Notre but etait de mettre en evidence l'heterogeneite genetique du deficit en galt par le biais de la recherche d'une complementation interallelique, a partir de 11 souches de fibroblastes (galt-). La methode consiste a fusionner d'abord des souches appariees, par le polyethyleneglycol. Dans un deuxieme temps intervient l'incorporation du (1-#1#4c) galactose et de la (3,4-#3h) leucine dans le materiel tca-precipitable des cellules ensemencees dans des puits de 2 cm#2. Le taux d'incorporation du #1#4c est rapporte a celui de la #3h leucine qui est temoin de la synthese proteique: r=#1#4c/#3h. Les appariements (galt-) (galt-) sont couples avec des croisements (galk-) (galt-) pour obtenir une complementation intergenique, en controle positif de la fusion cellulaire. Les simples cocultures (galk-) (galt-) nous ont amenes a demontrer l'existence d'une cooperation metabolique, par echange de galactose 1-phosphate accumule dans les cellules (galt-) vers les cellules (galk-). Cette cooperation ne se produit que s'il y a contact cellulaire, donc transfert par les jonctions communicantes. Le rapport r, #1#4c/#3h qui exprime l'importance des voies secondaires varie suivant les souches. L'appariement 2 a 2 de 11 souches (galt-) montre 6 combinaisons ou l'indice de complementation est superieur a 1,30. Une souche semble complementer avec 3 autres. Ces combinaisons seront reetudiees en milieu selectif galactose pour isoler des hybrides ou pourront etre etudiees les caracteristiques d'une activite enzymatique restauree


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  • Annexes : 220 REF

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
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  • Cote : TS1990
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