Topologie fonctionnelle de lamb : une proteine de membrane externe d'e. coli k12. implications pour la mise au point de vaccins bacteriens

par Alain Charbit

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Maurice Jacky Hofnung.

Soutenue en 1990

à Paris 7 .

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  • Résumé

    L'introduction de la these consiste en une revue sur differents systemes d'expression de peptides etrangers par fusion genetique in vitro a une proteine porteuse, en insistant sur l'immunogenicite des proteines hybrides. Les resultats experimentaux portent sur l'etude de lamb, une proteine de la membrane externe d'e. Coli k12 impliquee specifiquement dans l'adsorption de bacteriophages et dans le transport du maltose et des maltodextrines. Ils comportent deux aspects majeurs. D'une part, nous avons aborde l'etude de la topologie et des fonctions de lamb: par analyse de mutations conferant la resistance aux phages. Nous avons identifie plusieurs regions de la proteine impliquees specifiquement dans l'adsorption des phages et fait l'hypothese qu'elles etaient exposees en surface des bacteries. Nous avons montre que certaines de ces regions sont aussi impliquees dans le transport des sucres. Ces travaux nous ont permis de proposer un modele de repliement et d'organisation fonctionnelle de la proteine. Nous avons pu confirmer que plusieurs boucles de la proteine etaient exposees de part et d'autre de la bicouche lipidique, par insertion genetique in vitro en deux etapes d'un epitope etranger en differents sites de lamb. D'autre part, en utilisant lamb comme proteine pilote nous avons mis au point une methode genetique generale qui permet d'exprimer une grande variete de peptides etrangers en surface de bacteries gram#. Nous avons montre que l'insertion genetique d'epitopes viraux dans une boucle exposee de lamb permettait d'induire de fortes reponses anticorps contre ces peptides


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Informations

  • Annexes : 276 REF

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS1990
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