Construction de sondes cdna pour l'etude de la regulation de l'expression des genes de l'hormone luteinisante chez le rat et le mouton

par GISELE D'ANGELO-BERNARD

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Raymond Counis.

Soutenue en 1990

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    La lutropine est une hormone hypophysaire controlant la reproduction. Elle est composee de 2 sous-unites alpha et beta. Des clones recombinants pour lh ont ete selectionnes et isoles d'une banque de cdna hypophysiares de rat castre au moye d'oligonucleotides, puis sous-clones dans le vecteur m13 afin d'obtenir des sondes monocatenaires. Ces dernieres ont permis de montrer que le gnrh stimule, alors que les steroides gonadiques diminuent les contenus hypophysaires en mrna de lh. L'activite transcriptionnelle du gene de lh beta a ete mesuree par hybrication des mrna neosynthetises in vitro en presence d'utp marque, 21 jours apres castration l'activite transcriptionnelle du gene est comparable a celle de l'animal intact. A l'inverse, l'estradiol provoque une stimulation d'un facteur 2. Le cdna de lh beta ovin, dont la sequence a ete determinee apres criblage de la banque ovine au moyen du cdna lh beta de rat, compte 530 bases (60 codant pour le peptide signal, 363 pour l'apopeptide et 107 dans les regions 5 et 3 non-codantes). Cette approche a permis de corriger la sequence primaire precedemment etablie par sequencage peptidique et de montrer qu'elle differe par 2 amino acides de la lh beta bovine. Dans les ovaires de brebis, ce cdna detecte 2 transcrits de 1000 et 640 nucleotides, ce dernier ayant la taille du mrna hypophysaire. Une etude plus approfondie de la sequence de ce mrna permettrait de lui attribuer un role physiologique eventuel et d'etudier l'homologie avec le mrna hypophysaire


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  • Annexes : 105 REF

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1990
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