Isolement et expression fonctionnelle d'une sequence ancestrale codant pour les sites de liaison mu et delta des opioides

par Florence Cabon

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Paul R. Cohen.

Soutenue en 1990

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Dans un premier temps, est decrite une methodologie qui permet de detecter la synthese de sites de liaison des opioides apres traduction in vitro d'arnm provenant de tissus exprimant le recepteur. J'ai choisi comme modele la lignee cellulaire ng108-15 qui n'exprime que la classe delta des recepteurs des opioides. Dans ce systeme, j'ai montre que: 1) les arn de ces cellules dirigent in vitro la synthese d'une seule population de sites de liaiso qui presentent une affinite equivalente pour les ligands mu et delta; 2) la taille de la proteine synthetisee est de 51 kda. ; 3) ces sites de liaison sont codes par des arn dont la taille est comprise entre 6 et 8 kbases. J'ai utilise cette methotodologie pour cribler une banque d'adnc construite dans n vecteur d'expression procaryote. Les clones ont ete selectionnes par la capacite des arn correspondants aux insertions clonees a synthetiser in vitro des sites de liaison des opioides. J'ai ainsi isole un clone (opi) codant pour un site de liaison qui presente une affinite equivalente pour les ligands delta (kd=1,9nm) et mu (kd=3,2nm). L'analyse de la sequence nucleotidique de ce clone a montre une homologie complete avec la sequence env-y de e. Coli. J'ai montre sur les bacteries la presence de sites de liaison stereospecifiques pour la #3h dihydromorphine (kd=4,2nm). Par ailleurs, la transfection de opi dans des fibroblastes ou des cellules c6 a permis de mettre en evidence l'expression de sites de liaison de ligands opioides de specificite delta dans les fibroblastes et mu dans les c6. Une analyse par protection a la nuclease s1, effectuee avec un oligonucleotide contenu dans la sequence opi, a montre que cette sequence est partiellement homologue a celle des recepteurs des opioides. Ces resultats suggerent que la sequence opi-env y code pour un site ancestral de liaison des opioides


  • Pas de résumé disponible.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Annexes : 379 REF

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : T Paris 6 1990 434
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1990
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.