Preparation et caracterisation de silices poreuses modifiees par des polymeres et des copolymeres du n,n dimethylacrylamide. Utilisation pour la separation chromatographique des proteines

par VERONIQUE HOUSSE-FERRARI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Bernard Sébille.

Soutenue en 1990

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Le poly n,n-dimethylacrylamide (pdma) est adsorbe sur silice puis reticule in situ par irradiation au #6#0co ou par un faisceau d'electrons. La comparaison des droites d'etalonnage en chromatographie d'exclusion par la taille permet de montrer que la resolution est meilleure (pente plus faible) lorsque la phase d'adsorption du pdma est realisee dans un bon solvant. La densite de boucles de pdma est plus importante dans un mauvais solvant car on observe une diminution du coefficient de penetration (k#d) des proteines. Le depot de polymeres sur silice ne permet pas de masquer tous les silanols car on met en evidence, a ph: 8. 0, des interactions ioniques proteines basiques-silanols. Ces effets ont ete analyses par le modele du deplacement chromatographique qui permet de determiner le nombre de z de contacts proteine-phase stationnaire. Il y a en moyenne 3 sites en interactions avec le lysozyme et le cytochrome c. On montre que la constante apparente de l'echange, k#z, depend lineairement de z. En utilisant des copolymeres n,n dimethylacrylamide-acide acrylique ou n,n dimethylacrylamide-acrylate de glycidyle deposes sur silice nous avons realise des phases stationnaires anioniques soit carboxylate soit sulfonate. Une reticulation optimale d'origine radiochimique ou chimique a ete mise en evidence a partir de la separation d'un melange de proteines. La resolution maximale correspond au nombre de contacts le plus eleve, entre les proteines et le support echangeur sulfonate, qui est de l'ordre de 3 pour le lysozyme et le cytochrome c

  • Titre traduit

    Preparation and characterisation of porous silica modified by polymers and copolymers of n,n dimethylacrylamide. Utilisation for chromatographic separation of proteins


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  • Annexes : 86 REF

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : T Paris 6 1990 172
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1990
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