Clonage et sequencage de trois genes de la famille des inhibiteurs de proteases a serine : leur regulation par l'hormone de croissance et les mediateurs de l'inflammation

par Gilles Pagès

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Gérard Ailhaud.

Soutenue en 1990

à Nice .

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  • Résumé

    Les sequences d'adn complementaires de trois inhibiteurs de proteases a serine hepatiques de rat, spi-1, spi-2 et spi-3 possedent, a l'exception du site anti-protease, une homologie de 70 a 90%. Ces adn complementaires codent pour des polypeptides d'environ 45000 daltons. Les proteines spi-1 et spi-2 sont fortement regulees par l'hormone de croissance, les glucocorticoides potentialisant son action. La production de spi-3 augmente considerablement au cours de l'inflammation. Les trois genes correspondant sont organises en 5 exons et 4 introns. L'analyse des regions 5 montre: 1) une tres forte homologie dans la zone proximale du site d'initiation de la transcription couvrant environ 350 nucleotides; 2) la conservation de l'homologie entre spi-1 et spi-2 et une totale divergence avec spi-3 en amont de ce point. De plus, la region proximale du promoteur spi-3 possede une insertion de 42 paires de bases contenant un palindrome tres similaire a la sequence de reconnaissance du facteur transcriptionnel nfkb. La transfection de plasmides portant des deletions variables de l'extremite 5 du gene spi-1 a montre que le fragment d'adn contenant les 172 nucleotides proches du site d'initiation de la transcription suffisait pour induire une activite maximale du promoteur. Des experiences de transcription en systemes cellulaire et acellulaire ainsi que des experiences d'empreinte a la dnase n'ont pas permis d'identifier une region specifiquement impliquee dans l'action de l'hormone de croissance, dans une zone du promoteur couvrant 850 nucleotides


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  • Annexes : 302 REF

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