Constitution d'un système de clonage pour une souche de Brevibacterium à applications industrielles

par Chan Ka Ning Chan Kwo Chion

Thèse de doctorat en Biochimie. Biologie cellulaire et moléculaire. Sciences des aliments

Sous la direction de Pierre Galzy.

Soutenue en 1990

à Montpellier 2 .


  • Résumé

    Brevibacterium sp. R312, une souche coryneforme d'importance industrielle, possede une enzyme amidase etroitement impliquee dans la biotransformation des derives nitriles, amides et acides. Deux axes de recherche ont ete poursuivis dans le but de cloner le gene de l'amidase. La premiere voie consiste a utiliser les techniques de clonage developpees chez escherichia coli. Ainsi, une banque genomique de brevibacterium sp. R312 a ete constituee. La proteine amidase a ete purifiee et le microsequencage peptidique n-terminal effectue. Des sondes oligonucleotidiques adequates ont ete recherchees et testees sur la banque. Les travaux preliminaires des clones positifs sont abordes. Le deuxieme axe de recherche concerne le developpement d'un systeme de clonage chez brevibacterium sp. R312. Les methodes de transformation de protoplastes et l'electroporation de cellules entieres ont ete testees avec succes. La technique d'electrotransformation a ete optimisee. La replication de differents plasmides cryptiques de souches voisines a ete examinee chez brevibacterium sp. R312. Deux vecteurs navettes escherichia coli/brevibacterium ont ete construits; ils possedent plusieurs sites de clonage uniques et expriment la resistance a la neomycine et a la tetracycline chez brevibacterium

  • Titre traduit

    Setting up a cloning system for a brevibacterium strain which has industrial applications


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Informations

  • Détails : [4], 195 f
  • Annexes : Bibliogr.: f. 164-188

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