Catabolisme des n-glycosylproteines. Etude comparee de la specificite des alpha-d-mannosidases cytosoliques et lysosomiques du foie de rat

par JEAN-FRANCOIS HAEUW

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Gérard Strecker.

Soutenue en 1990

à Lille 1 .

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  • Résumé

    Dans le but d'etudier la specificite de substrat des enzymes impliques dans le catabolisme des glycannes de type oligomannosidique, differents oligosaccharides ont ete incubes avec les alpha-d-mannosidases du lysosome et du cytosol de foie de rat et la structure des produits d'hydrolyse enzymatique a ete determinee par spectroscopie rmn du proton a 400 mhz. Le schema de degradation lysosomique obeit a une sequence ordonnee, realisee en deux etapes successives, l'une conduisant du man#9glcnac au man#5glcnac par hydrolyse preferentielle des residus de mannose lies en alpha-1,2 et l'autre, zn#2#+ dependante, conduisant au manglcnac par hydrolyse des residus lies en alpha-1,3 et alpha-1,6. L'action de la mannosidase cytosolique aboutit par contre a la formation d'un oligosaccharide unique et lineaire man#5glcnac qui possede une structure identique a l'un des intermediaires polyprenoliques, dit de biosynthese, elabore sur la face cytoplasmique du reticulum endoplasmique. La resistance a l'hydrolyse de ce compose est en faveur d'un systeme protecteur et/ou regulateur de ces intermediaires, ceux-ci etant ensuite utilises dans le lumen du reticulum pour un assemblage complet de l'oligosaccharide precurseur des glycannes des n-glycosylproteines. Enfin, ces resultats suggerent l'existence d'une synergie entre les compartiments cytosolique et lysosomique: la degradation de certains oligosaccharides, dont l'origine reste a elucider, debuterait dans le cytosol et les produits lineaires formes seraient ensuite conduits vers les lysosomes ou l'hydrolyse se poursuivrait. Cette methode a par ailleurs permis de confirmer les schemas prealablement determines pour les mannosidases du reticulum endoplasmique rugueux et de l'appareil de golgi. D'un point de vue structural, cette etude a conduit a l'analyse rmn complete de nombreux oligosaccharides et a l'attribution d'un grand nombre de parametres nouveaux


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  • Annexes : 204 REF

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