Utilisation de lignées épithéliales pérennisées pour l’étude du développement embryonnaire précoce et de ses anomalies

par Nadia Ouhibi

Thèse de doctorat en Embryologie - Analyse et Modélisation des Systèmes Biologiques

Sous la direction de Yves Ménézo.

Soutenue en 1990

à Lyon, INSA , en partenariat avec LBA – Laboratoire de Biologie Appliquée (Lyon, Rhône) (laboratoire) .


  • Résumé

    L'analyse des paramètres caractéristiques du mouvement des spermatozoïdes humains déposés sur différents supports cel1ulaires épithéliaux d'origine génitale (oviducte, endomètre) et non génitale (Vero) montre que le phénomène d'hyper activation des spermatozoïdes s'observe exclusivement sur les supports cellulaires d'origine génitale. L'utilisation de ses mêmes supports cellulaires (oviducte, Vero, MDBK), en mono couche, permet d'obtenir chez la souris des taux de formation de blastocystes élevés, associés à un bon maintien de la viabilité après transfert (67%). Cependant, pour une même origine embryologique (rénale) les pourcentages de développement sont très variables (Vero 8% vs MDBK 69%). La différence observée dans l'effet embryotrophique des différents supports cellulaires à l'égard des embryons de différentes espèces n'est pas surprenante : il existe d'importantes différences dans l'équipement enzymatique entre. Les embryons de souris et les embryons humains. L'efficacité des différents supports cellulaires à promouvoir le développement embryonnaire, nous a permis de confirmer la non hormona-dépendance et la non spéci-spécificité des facteurs embryotrophiques. L'effet bénéfique de la co-culture n'est donc pas strictement spécifique des cellules du tractus génital femelle mais semble plutôt être dépendant des épithélia transporteurs. Les voies métaboliques simples ont été étudiées pour évaluer les modifications induites dans le milieu de culture par les différents supports cellulaires. Notre étude montre a) que les supports cellulaires, quelle que soit l'origine, ne libèrent pas d'acides gras libres dans le milieu, b) qu'il n'y a pas de relation entre la diminution de glucose et le développement embryonnaire en co-culture, c) que les meilleurs supports cellulaires modifient le milieu de co-culture en mimant les sécrétions tubaires. Les lignées établies constitueraient un excellent outil pour l'analyse du blocage embryonnaire et l'application à la sélection des embryons micro manipulés (clonage, transfert de gènes).

  • Titre traduit

    = Use of epithelial established celllines for the study of early embryonic development and its abnormalities


  • Résumé

    [The analys of human sperm swimming on different epithelial supports from genital (oviduct, endometrium) and non genital (kidnet cells : vero) trct riigin show a phenomenon of whiplash mobility , especialy on genital tract cell monolayers. In the mouse, the epithelial cell lines (genital cells : oviduct, kidney cells : vero, MDBK) in monolayers, allow good embrionic developpment as shown by the maintenance of viability after transfer. However for tissue of the same embryological origin i. E. Kidney, the rel=sults are highly variable : the embryotropic potentials of vero and MDBK are very different. The embryotropic factors are neither hormone-dependent, nor tissue-specific ; they seem rather transport epithelium dependent. Simple metabolic patways were studied to evaluate the modification induced in the culture meduim by cell feeders Our study show that: a) epitelial cell monolayers do not release free fatty acid in the meduim, b) ther is no relation ship between a decrease in glucose content, a rise in lactate level and ambryonic development in co-culture, c) the best feeder cell support leads to modificaion of the culture meduim mimieking tubal secretions. The feeders are able to drive the embryometabolism from outside exogenous sources. The established cell lines could be useful tool for the study of embrryonic development arrest and the application for a selection of micro manipulated embryos (cloning, gene transfer)]

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Informations

  • Détails : 1 vol. (167 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Institut national des sciences appliquées (Villeurbanne, Rhône). Service Commun de la Documentation Doc'INSA.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : C.83(1263)
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