Effets de biomolécules sur la diffusion de sondes fluorescentes dans des milieux organisés

par Abderrahim Naoumi

Thèse de doctorat en Génie des procédés

Sous la direction de Jean-Claude André.

Soutenue en 1990

à Vandoeuvre-les-Nancy, INPL .


  • Résumé

    Les interactions protéines-lipides sont responsables de nombreuses fonctions physiologiques; une meilleure connaissance de ces interactions est la clef de la compréhension de nombreux processus biologiques. Pour étudier de tels systèmes mais éviter la complexité de la structure membranaire, nous avons choisi de réaliser une étude photophysique sur des membranes modèles constituées de phospholipides purs, prises comme support de la matrice lipidique de la membrane biologique. Ainsi, par l'étude du déclin de fluorescence du pyrène, sonde moléculaire émissive utilisée dans le présent travail, nous avons déterminé le coefficient de diffusion latérale (DL) du pyrène dans des liposomes de dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), DL = 5 10-7 cm2/s, à T > TM (TM, température de transition de phase). Ensuite, nous avons mesuré l'effet de deux protéines, la (Na+ ,K+)-ATPase et la y-glutamyltransférase sur ce coefficient dans des liposomes de DPPC et mis en évidence la décroissance de DL avec l'augmentation de la concentration en protéines. Pour ce faire, DL est obtenu à l'aide d'un modèle cinétique qui permet d'extraire une information sur le transport dans des déclins de fluorescence. Par ailleurs, l'utilisation de la polarisation de fluorescence et la fluorescence d'excimères intramoléculaires du dipyrénylpropane (P3P) nous a permis d'étudier les interactions cyclosporine A/DPPC d'une part, et hormones thyroi͏̈diennes et composés thyromimétiques apparentés/membranes microsomales, d'autre part. Dans le premier cas, la polarisation de fluorescence du 1,6-diphényl-l,3,5-hexatriène (DPH) et du 1 [4-(triméthylamino)phényl]-6-phényl-l,3,5-hexatriène (TMA-DPH) montre que la cyclosporine A est sans effet sur la transition de phase des liposomes, alors que, cette drogue entraîne une diminution du rapport IE/IM (IE, intensité de fluorescence de l'excimère ; IM, intensité de fluorescence du monomère) du P3P à T > TM, ce qui est compatible avec un effet fluidifiant. Dans le second cas, les mesures de la polarisation de fluorescence du DPH dans des microsomes de foie de rats témoins et de rats traités par des hormones thyroi͏̈diennes et analogues montrent que ces produits n'ont aucun effet sur la fluidité membranaire, telle qu'elle est estimée par cette méthode. Enfin, nous avons utilisé les trois approches spectroscopiques pour étudier l'influence de la température et de la concentration sur la structure et la microviscosité de tensio-actifs non ioniques, tels que C12(EO)6 et C12(EO)8 (monododécyléther de polyoxyéthylène)

  • Titre traduit

    Biomolecules effects on diffusion of fluorescent sensors in organized media


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Informations

  • Détails : 1 vol. (231 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 211-231

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  • Bibliothèque : Université de Lorraine. Direction de la documentation et de l'édition. BU Ingénieurs.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1990 NAOUMI A.
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