Activation de la nadph-oxydase productrice d'ions superoxyde dans les polynucleaires neutrophiles. Etude d'un systeme acellulaire et purification d'un facteur cytosolique activateur de l'oxydase

par MARIE-CLAIRE PILLOUD DAGHER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Pierre Vignais.

Soutenue en 1990

à Grenoble 1 .

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  • Résumé

    Les polynucleaires neutrophiles jouent un role majeur dans la defense contre les microorganismes invasifs. Ils sont capables d'ingerer et de detruire les particules etrangeres par l'action d'une nadph-oxydase productrice d'ions superoxyde, localises dans la membrane plasmique. L'etude du mecanisme d'activation de ce complexe enzymatique a beneficie de la mise au point de systemes acellulaires. L'activation de cette enzyme peut etre obtenue in vitro par l'action conjuguee de proteines du cytosol (facteurs cytosoliques) et d'un acide gras a longue chaine polyinsature. Pour purifier ces facteurs cytosoliques, les conditions de leur dosage ont tout d'abord ete etudiees. Les facteurs cytosoliques perdent leur activite quand ils sont separes. Pour cette raison, une methode de recombinaison a ete mise au point et a permis de detecter un facteur cytosolique de 63 kda pendant sa purification. Le rendement a ete de 5%. Ce facteur est specifique des cellules phagocytaires et est transfere vers la membrane plasmique sous l'effet de l'acide gras


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