Caractérisation et purification d'une NADPH cytochrome c réductase des granulocytes neutrophiles de lapin impliquée dans la production des ions superoxyde au cours de la phagocytose

par François Laporte

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Pierre Vignais.

Soutenue en 1990

à Grenoble 1 .


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  • Résumé

    La membrane plasmique des granulocytes neutrophiles contient une oxydase capable, quand les cellules ont ete stimulees, de produire des ions superoxyde. Ces ions sont impliques dans la destruction des microorganismes au cours de la phagocytose. Nous avons caracterise dans la membrane plasmique des neutrophiles de lapin, une enzyme qui possede une activite nadph cytochrome c reductase. Un certain nombre de resultats experimentaux montrent que cette enzyme participe a la production des ions superoxyde. Nous avons defini des conditions qui permettent de conserver ou de restaurer l'activite de production d'ions superoxyde dans les membranes, soit en reticulant les cellules par le glutaraldehyde, soit en traitant les membranes avec de l'acide arachidonique. La transformation de l'activite nadph cytochrome c reductase en activite nadph oxydase est reversible, et resulte de l'interaction plus ou moins forte de la reductase avec d'autres proteines membranaires et sans doute cytosoliques. La nadph cytochrome c reductase a ete purifiee: il s'agit d'une flavoprotoeine de 77 kd distincte du cytochrome b. Les caracteristiques cinetiques de cette proteine ont ete etudiees, et nous avons montre que l'addition de la reductase purifiee a un extrait soluble de la membrane plasmique, permet d'augmenter notablement la production des ions superoxyde par cet extrait, apres activation. Les caracteristiques biochimiques de cette enzyme montrent une grande similitude avec celles de la nadph cytochrome p-450 reductase des microsomes. Cependant, il parait probable que la reductase de ces membranes fonctionne en association avec le cytochrome b#5#5#8 pour produire des ions superoxyde

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  • Détails : 120 p

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  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
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  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 90/GRE1/0038
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