La micronucléation induite : définition d'un modèle cellulaire micronuclée pour l'étude du génome interphasique

par Sylvie Frackowiak

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire

Sous la direction de Roland Rosset.


  • Résumé

    Dans les cellules ptkl de rat kangourou, un traitement prolonge a la colchicine induit la formation de sous-unites genomiques, les micronoyaux contenant de l'adn interphasique. Dans ce travail, nous nous proposons 1) de verifier l'integrite des chromosomes apres micronucleation; 2) d'identifier le contenu chromosomique des micronoyaux; et 3) de verifier l'activite de l'adn dans les micronoyaux isoles. Ainsi, grace a la cytometrie en flux, l'etude des caryotypes et un marquage immunocytochimique (auto-anticorps anti-kinetochores), nous montrons que dans nos conditions experimentales, la micronucleation n'affecte pas l'integrite des chromosomes quant a leur morphologie et leur nombre. Par ailleurs, apres isolement des micronoyaux dans des conditions vitales, nous avons compare les histogrammes en flux de micronoyaux fluorescents isoles et de chromosomes metaphasiques; l'etroite correlation dans le nombre et la distribution des pics montre qu'il est possible d'identifier le contenu en adn des micronoyaux, particulierement ceux renfermant la paire chromosomique portant un marqueur, le chromocentre. Enfin, l'etude des syntheses d'arn dans les micronoyaux revele une activite transcriptionnelle in situ et apres isolement. En conclusion, les micronoyaux s'averent d'excellents outils pour l'etude du role de chacun des chromosomes consideres individuellement, dans l'organisation et la physiologie des noyaux interphasiques


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Informations

  • Détails : 76 f., 20 pl..
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr.f. 71-76

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  • Bibliothèque : Université Aix-Marseille (Marseille. Luminy). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 17664
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