Formation de la membrane basale au cours de la régénération de l'annélide polychète (Owenia fusiformis) : caractérisation et expression spatio-temporelle d'un gène apparenté au collagène

Basement membrane elaboration during annelid polychaete regeneration (Owenia fusiformis): characterization and spatio-temporal expression of a collagen-like gene

• Auteur / Autrice : Frédérique Dupin
• Direction : Yves Thouveny
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et microbiologie
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences (1969-2011)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Annélides

Polychètes

Résumé

L'hybridation in situ sur coupes de fragments d'adn recouvrant les parties codantes d'un gene ocg8, apparente au collagene, montre que son expression, au cours de la regeneration cephalique par epimorphose de l'annelide polychete: owenia fusiformis, est spatio-temporelle. Six clones recombinants ocg 6, 7, 8, 16 et 19 isoles a partir d'une banque genomique, a l'aide d'une sonde heterologue correspondant au collagene pro #2 (i) de poulet ont ete identifies. Un southern-blot de ces differents clones hybride avec des sondes collageniques transspecifiques revele l'existence de fragments genomiques presentant des signaux d'hybridation croisee avec ces sondes. Ces clones ont ete soumis a l'analyse des frequences de coupure, par l'enzyme de restriction sau 961, qui reconnait la sequence ggnccn codant pour le motif peptidique gly-pro. Cette approche permet une identification rapide de sequences collagen-like. Le clone ocg8 a ete plus particulierement analyse. La sequence nucleotidique etablie, et, traduite en amino-acide, correspond au motif repete (gly-xaa-yaa)#n, caracteristique des chaines en triple helice, communes a tous les types de collagene connus a ce jour. L'etude de l'expression du gene ocg8, au cours des principales etapes conduisant a la reformation des matrices extracellulaires montre que l'accumulation des transcrits est uniquement localisee au niveau du tissu ectodermique au cours de la redifferenciation du regenerat. L'analyse en northern-blot met en evidence un messager unique de haut poids moleculaire (6,6 kb)