Etude d'un mutant du virus de l'herpes simplex (hsv) thermosensible pour l'assemblage des capsides

par BRIGITTE PERTUISET

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de SLONIMSKI.

Soutenue en 1989

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Nous avons caracterise genetiquement le mutant ts2 d'hsv1 incapable, a temperature non permissive, d'assembler des capsides dans le noyau des cellules infectees et de decouper en unite genomique l'adn viral synthetise a un taux comparable a celui du sauvage. Par des experiences de sauvetage de marqueur intra ou intertypiques (hsv1/hsv2) nous avons localise la mutation responsable de ce phenotype entre les coordonnees 0. 554-0. 560 du genome d'hsv1 soit dans un fragment de 900 pb de la region ul. La sequence du genome de la souche parentale a44 a ete determinee entre les coordonnees 0. 551 et 0. 565. Elle contient: une phase ouverte de lecture de 365 codons, dont la traduction aboutit a un peptide de 50k; les signaux potentiels de transcription du messager de 1. 9 kb, par ailleurs cartographie entre les coordonnees 0. 553 et 0. 564 et traduit in vitro en une proteine de 54k. La sequence peptidique ainsi determinee est fortement homologue au produit de traduction deduit de la phase de lecture ouverte 20 du virus de la varicelle-zona et faiblement homologue a celui deduit de la phase de lecture ouverte borf1 du virus d'epstein-barr. Pour ces trois virus herpetiques, ces genes sont situes en amont des genes codant pour les deux sous-unites de la ribonucleotide reductase virale. La determination de la sequence du mutant ts2 a permis de mettre en evidence une mutation de c vers t dans la phase ouverte de lecture, transition frequemment observee apres action de la nitrosoguanidine, agent mutagene utilise pour l'obtention de ce mutant. La responsabilite portee par cette mutation dans le phenotype thermosensible de ts2 a ete demontree par des experiences de sauvetage de marqueur realisees a l'aide d'oligonucleotides synthetiques. Le changement pro 121 en leu ainsi provoque, altere, d'apres les predictions informatiques, la structure secondaire de la proteine. Nous discutons du role possible de cette protein

  • Titre traduit

    Studies on a temperature-sensitive mutant of herpes simplex virus (hsv) defective in capsid assembly


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