Isolement et culture "in vitro" de protoplastes de vignes (Vitis vinifera L. Et Vitis rupestris Scheele)

par Kelin Yin

Thèse de doctorat en Biologie et physiologie végétale

Sous la direction de Robert Jonard et de R. JONARD.

Soutenue en 1989

à Montpellier 2 .


  • Résumé

    Ce memoire est consacre a l'obtention d'un materiel vegetal susceptible de fournir des protoplastes vegetaux, dans des conditions parfaites. Des feuilles, cotyledons, hypocotyles, racines et cals sont obtenus a la suite de microbouturages ou de germination de pepins in vitro sur 5 cultivars de la vigne: grenache, cabernet-sauvignon, clairette, carignan, rupestris du lot et un hybride de plantet (5455). L'isolement des protoplastes a ete realise a partir de ces explants eleves dans des conditions d'axenie rigoureuse et rendus plus reactifs que les memes organes preleves en vignoble sur les plantes-meres par cette acclimatation prealable a la culture in vitro. Pour l'isolement des protoplastes foliaires, nous avons utilise un melange enzymatique de maceration associant 1% de cellulase et 1,0% de driselase. Pour les autres organes 2% de cellulase et 0,5-1,0% de macerozyme. Plusieurs facteurs pouvant influencer l'isolement des protoplastes ont ete etudies en particulier pour les protoplastes issus de cals cotyledonnaires. Les protoplastes isoles sont purifies par la technique de flottaison sur une solution de 10% de ficoll centrifugee a 250 g pendant 20 min. Au cours de la culture des protoplastes: la regeneration d'une nouvelle paroi cellulaire, des phenomenes de "bourgeonnement" et de declenchement de trois divisions cellulaires successives, ont ete observes chez des protoplastes isoles a partir d'hypocotyles de grenache cultives dans le milieu liquide de kao & michayluk (8p) modifie par l'addition de 2,0 mg/l 2,4-d, 1,0 mg/l bap et 0,6 mannitol

  • Titre traduit

    Isolation and culture of protoplasts from grapevine (vitis vinifera l. And vitis rupestris scheele)


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Informations

  • Détails : [3] f., xiii, 260 [i.e. 251] p., [6] f. de pl
  • Annexes : Bibliogr.: p. [206]-253. Index alphabétique de sujets p. 255-260

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  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 89.MON-019
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