Activités enzymatiques de l'élastase de Pseudomonas aeruginosa

par Joëlle Saulnier

Thèse de doctorat en Sciences. Biochimie

Sous la direction de Jean Wallach.

Soutenue en 1989

à Lyon 1 .

Le jury était composé de Jean Wallach.


  • Résumé

    Pseudomonas aeruginosa est une bacterie pathogene qui est responsable de nombreuses infections graves. Il a ete demontre que l'elastase secretee par la bacterie contribue a la pathogenicite de celle-ci mais son role exact n'a pas ete clairement elucide. C'est pourquoi nous avons entrepris d'etudier quelques unes de ses proprietes tant structurales qu'enzymatiques. Apres des rappels bibliographiques et la presentation des materiels et methodes utilises, nous avons expose nos resultats: 1) les vitesses initiales d'elastolyse d'elastines bovine et humaine par l'elastase ont ete mesurees par la methode conductimetrique. Il apparait que, quelle que soit l'elastine, l'affinite vis-a-vis de l'elastase de p. Aeruginosa est plus faible que pour les elastases pancreatique et leucocytaire mais l'activite est plus forte. 2) la stabilite thermique de l'elastase a ete etudiee lors d'experiences de denaturation et de desactivation thermique. L'elastase est stable (temperature de fusion principale d'environ 70#oc) et peu sensible a des effecteurs ioniques pour des concentrations de l'ordre du millimolaire. Par contre, meme a 30#oc, on peut mettre en evidence une desactivation, ce qui est en accord avec un modele a trois etats. 3) pour preciser la specificite de l'enzyme, nous avons synthetise et suivi l'hydrolyse de substrats synthetiques: furylacryloyl-tripeptides, oligomeres d'alanine et tetrapeptides du type ala-ala-x-ala. Il est apparu notamment que l'hydrolyse des oligomeres d'alanine est possible a partir de la tetraalanine, que l'augmentation du nombre d'alanine s'accompagne d'une augmentation de l'affinite et de l'activite. Enfin, dans le cas des tetrapeptides, c'est la leucine en position p1 qui entraine l'hydrolyse la plus efficace. La derniere partie a ete consacree a la mise au point du dosage conductimetrique de l'activite elastolytique dans des surnageants de cultures de p. A


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Informations

  • Details : 1 vol. (145 p.-[1] dépl.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 137-145

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  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
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